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作者：董宁宁;张琦;谈晓梅;李娜;朱雯琪;刘光清;孟春春;
单位：新疆农业大学动物医学学院;中国农业科学院上海兽医研究所伴侣动物生物安全风险预警与防控技术团队;
摘要：旨在鉴定并深入研究NS2蛋白在猫杯状病毒(FCV)感染中的作用。根据FCV SH2014株的基因序列，利用生物信息学技术对NS2蛋白进行了分析，将其在110 aa处截短为2个基因片段(NS2-N和NS2-C),将2个NS2-N相连接。筛选出成功表达的重组蛋白，使用弗氏佐剂乳化后免疫新西兰大白兔。通过Western blot和间接免疫荧光试验(IFA)验证多克隆抗体的特异性识别能力。结果：成功构建了pET-32a-NS2-N和pET-32a-NS2-N-N重组质粒，并在上清液和包涵体中稳定表达了预期大小的重组蛋白。制备的多克隆抗体能特异性识别多个病毒株的NS2蛋白。结论：成功制备兔抗NS2蛋白的多克隆抗体，为深入研究FCV NS2蛋白的结构和功能提供了试验材料，为进一步阐明该病毒的致病机制奠定基础。
关键词：猫杯状病毒;NS2蛋白截短;原核表达;多克隆抗体
基金资助：国家重点研发计划项目(2022YFD1800100); 国家自然基金面上项目(32272982); 上海市自然基金项目(23ZR1477100)
