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作者：余群;邹艳丽;陈欢;刘珊;苗雨润;任炜杰;王振忠;何佳依;高晓宇;钱莺娟;吴晓东;郑龙三;
单位：南京农业大学动物医学院/教育部动物健康与食品安全国际合作联合实验室/农业农村部细菌学重点实验室;中国动物卫生与流行病学中心/国家非洲猪瘟参考实验室;
摘要：旨在制备非洲猪瘟病毒(ASFV)非结构蛋白pS183L的多克隆抗体。根据公布的毒株ASFV China/2018/Anhui XCGQ基因序列设计引物，酶切连接法构建重组质粒pET-28a-S183L;经鉴定成功的质粒转化大肠杆菌Rosetta,诱导表达后经镍柱亲和层析纯化后获得重组蛋白pS183L,免疫小鼠并制备抗pS183L的多克隆抗体。通过ELISA鉴定多克隆抗体效价大于1∶128 000;Western blot和间接免疫荧光试验(IFA)表明，该多克隆抗体能识别293T和PK15细胞外源表达蛋白及ASFV感染猪肺泡巨噬细胞(PAMs)内源表达蛋白。综上，本研究成功制备抗pS183L多克隆抗体，为深入研究ASFV pS183L的功能提供了关键生物材料。
关键词：非洲猪瘟病毒;pS183L;多克隆抗体
基金资助：国家重点研发计划资助项目(2021YFD1801200); 江苏省重点研发计划(现代农业)重点项目(SBE2020310346)
