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作者：沈海潇;李鑫;杨德全;葛菲菲;王建;黄士新;姜平;
单位：南京农业大学动物医学院/农业农村部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室;上海市动物疫病预防控制中心;
摘要：旨在建立一种检测犬C群轮状病毒(CRV C)的探针法实时荧光反转录环介导等温扩增方法(RT-LAMP)。以病毒基因组的保守序列VP6为靶标，设计合成1组LAMP引物探针，对反应的各项参数进行优化后确定方法的特异性、敏感性等各项指标，进行临床样品检测以评估方法的实际效果。结果：该方法检测下限为7.71×10~0 copies/μL,敏感性与荧光定量RT-PCR相当。重复试验结果的变异系数小于4.35%。与犬A群轮状病毒(CRV A)、犬瘟热病毒(CDV)、犬细小病毒(CPV)、犬肠道冠状病毒(CCoV)和犬星状病毒(CaAstV)均无交叉反应。临床样品检测符合率试验表明，本方法与荧光定量RT-PCR方法的总体符合率达到了98.46%(64/65)。综上，本研究建立的探针法实时荧光RT-LAMP方法具有反应快速、灵敏度高、特异性强、仪器成本低等优点，可用于CRV C快速检测、临床诊断与疫病监测。
关键词：探针法;环介导等温扩增;犬C群轮状病毒;快速检测
基金资助：上海市科技兴农项目(2022-02-08-00-12-F01122)
