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作者:孙文;张永毅;陆畅;朱德文;尹媛媛;徐泉明;陈叶;
单位:福建农林大学动物科学学院(蜂学学院),闽台动物病原生物学福建省高校重点实验室;福建警察学院;
摘要:为了研究猪链球菌2型(SS2)核糖核酸酶Ⅲ(RNaseⅢ)的催化特性,利用大肠杆菌BL21(DE3)异源表达猪链球菌2型RNaseⅢ(SS-RNaseⅢ)并通过镍柱亲和层析的方法分离纯化。异源表达研究显示,重组蛋白RNaseⅢ大部分为可溶性表达;催化特性研究显示,RNaseⅢ主要依赖Mg~(2+)或Mn~(2+)发挥催化功能,并在不同离子浓度和pH值环境下具有不同的催化活性;底物特异性研究显示,RNaseⅢ特异性切割长度为30 bp的双链RNA,同时对内源性的rnc mRNA和5S rRNA具有良好的特异性。上述结果表明,相较于其他细菌RNaseⅢ,SS-RNaseⅢ具有独特的催化特性,为深入理解RNaseⅢ如何介导SS2致病机制奠定了基础。
关键词:猪链球菌2型;核糖核酸酶Ⅲ;原核表达;催化特性
基金资助:福建省自然科学基金项目(2023J01272); 福建农林大学科技创新专项(CXZX2020061A)