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作者:陈艳;龙云凤;姜焱;周斌;
单位:南京农业大学动物医学院;南京海关动植物与食品检测中心;
摘要:以原核系统表达的非洲猪瘟病毒p54重组蛋白为免疫原接种BALB/c小鼠,经过细胞融合、间接ELISA筛选和多次亚克隆获得了3株能够稳定分泌抗p54蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞系,分别命名为2A4、5F6和RH15。3株单克隆抗体的重链均属于IgG1亚类,轻链均为Kappa型。Western blot和免疫荧光试验(IFA)证明3株单克隆抗体具有良好的反应性,可以用于靶抗原的特异性检测。通过噬菌体展示肽库筛选,确定了单克隆抗体2A4、5F6识别的抗原表位为~(157)NTASQ~(161),RH15识别的抗原表位为~(170)RQRNTYTHKDL~(180),进一步完善了靶抗原的B细胞线性抗原表位信息。
关键词:非洲猪瘟病毒;p54蛋白;单克隆抗体;抗原表位
基金资助:江苏省重点研发计划(现代农业)项目(BE2022394)