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作者：周一帆;江政霆;李雨;焦开智;潘书慧;许芮;李广丽;江东能;
单位：广东海洋大学水产学院;广东省名特优鱼类生殖调控与繁育工程技术研究中心;
摘要：【目的】分析DNA甲基化修饰对金钱鱼（Scatophagus argus）卵巢Cyp17a1表达的影响，进一步认识卵巢发育成熟相关基因表达的调控机制。【方法】分别取卵巢发育III、IV期的金钱鱼，以及投喂添加0（对照）、50、100μg/g雌二醇饲料30 d的2龄雌鱼，用MethPrimer软件分析其Cyp17a1基因CpG二核苷酸位点分布特征，并预测CpG岛；采用亚硫酸氢盐测序法检测不同发育时期卵巢以及投喂雌二醇个体卵巢中的Cyp17a1的DNA甲基化修饰水平，并用实时荧光定量PCR分析Cyp17a1基因表达水平。【结果】金钱鱼Cyp17a1翻译起始位点2 000 bp后无CpG岛，取第1外显子含有5个CpG位点（翻译起始位点后106、116、129、148和203 bp处）的区域用于DNA甲基化水平检测。金钱鱼III期卵巢Cyp17a1外显子1的DNA甲基化修饰水平显著高于IV期卵巢（P <0.05），与其mRNA表达水平呈负相关。116、129和203 bp处DNA甲基化存在发育时期差异，但106和148 bp处差异不显著（P> 0.05）。投喂雌二醇后，金钱鱼卵巢Cyp17a1 mRNA表达水平和第1外显子CpG富集区域整体DNA甲基化修饰水平无显著变化（P>0.05），但雌激素处理雌鱼翻译起始位点后148、203 bp处甲基化水平明显上升（P <0.05）。【结论】金钱鱼卵巢Cyp17a1第一个外显子CpG富集区的整体甲基化水平与基因表达呈负相关，饲料E2可上调Cyp17a1第一个外显子148、205 bp处甲基化水平，表明甲基化修饰参与金钱鱼Cyp17a1的表达调控。
关键词：金钱鱼;;Cyp17a1;;基因表达;;亚硫酸氢盐测序法;;DNA甲基化
基金资助：国家自然科学基金面上项目（32172971）;; 广东省自然科学基金面上项目（2021A1515010430）
