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作者：张美娜;张子豪;洪佳乐;郭朝辉;李海洁;于光晴;董鹏生;黄小城;杨振江;王延晖;刘变枝;
单位：河南农业大学动物科技学院;华兰生物工程股份有限公司;河南省水产科学研究院水产养殖与遗传育种研究室;
摘要：【目的】探究鲤环指蛋白14(ring finger protein 14,RNF14)基因的生物学功能，为阻断鲤春季病毒血症病毒（spring viremia of Cyprinus carpio virus, SVCV）感染提供新思路。【方法】采用PCR技术、生物信息学分析和实时荧光定量PCR方法，对鲤RNF14基因功能进行初步分析，研究其在病毒刺激后的表达规律。【结果】鲤RNF14基因编码区全长1 362 bp，编码453个氨基酸；鲤RNF14与犀角金线鲃亲缘关系较近，与原鸽亲缘关系较远；该蛋白属酸性不稳定亲水性蛋白；功能结构域预测显示该蛋白为典型的RBR E3s；泛素化底物分析结果显示，该蛋白与RBCK1、Nedd4l、Notch1a等蛋白相互作用的置信度较高。组织表达谱分析表明，鲤RNF14基因在各组织或器官中广泛表达，以心脏中相对表达量最高。与对照组相比，高剂量SVCV在体感染鲤24 h后，RNF14基因的mRNA表达水平在肌肉中显著升高；多肌胞苷酸（polyinosinic acid-polycytidylic acid,ploy(I:C)）在体刺激鲤24 h后，RNF14基因的mRNA表达水平在肾脏和头肾中显著升高。与对照组相比，低剂量SVCV和poly(I:C)离体刺激下，鲤RNF14基因mRNA表达水平在各取样时间点均极显著升高。在体和离体病原刺激结果表明，鲤RNF14基因参与了病原刺激后的免疫应答过程，提示鲤RNF14基因可能是阻断SVCV感染的潜在靶点。【结论】成功克隆了鲤RNF14基因的基因编码区，揭示了鲤RNF14基因在SVCV和poly(I:C)刺激下免疫响应规律。
关键词：鲤;环指蛋白14;生物信息学;鲤春季病毒血症病毒;多肌胞苷酸;病原刺激;免疫响应
基金资助：国家自然科学基金项目（31702359）; 河南省科技研发联合基金项目（222103810017）; 河南省高等学校重点科研项目（23A240001）; 河南省现代农业产业技术体系（HARS-22-16-T）
