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作者：徐庶勋;魏志恒;姜新城;刘世昊;吴文平;王倚兰;邵芳;顾志良;
单位：常熟理工学院生物与食品工程学院;南京医科大学附属常州市第二人民医院;
摘要：为了探究硫氧还蛋白还原酶1(thioredoxin reductase1, TXNRD1)基因对鸡肝细胞脂类代谢相关基因表达的影响，试验以鸡的肝脏和脂肪组织cDNA为模板，PCR扩增鸡TXNRD1基因编码序列(CDS),测序鉴定后用生物信息学分析编码蛋白及其特性，构建鸡TXNRD1基因的真核表达载体，将其转染鸡肝癌细胞系(LMH)后对表达产物用Western-blot鉴定，采用实时荧光定量PCR检测LMH细胞中过表达TXNRD1基因对脂类代谢相关基因表达的影响，以及鸡不同组织TXNRD1基因的表达情况。结果表明：获得了鸡TXNRD1基因1 497 bp的CDS片段，共编码499个氨基酸；该蛋白分子量为54 818.7 u,理论等电点pI为6.03,不稳定系数为34.60(<40),为稳定蛋白，平均亲水性为-0.168(<0),为亲水蛋白质；构建真核重组表达载体gga-TXNRD1/pCMV-3Tag-9在LMH细胞中成功融合，并表达鸡TXNRD1-MYC;在LMH中过表达TXNRD1基因后LPL基因表达量显著下降(P<0.05),FASN基因表达量显著上升(P<0.05);TXNRD1基因在小肠、肾脏中表达量较高，在肝脏、腿肌、腺胃、胸肌表达量较低。说明TXNRD1基因对鸡肝脏脂类的合成具有促进作用。
关键词：鸡;;硫氧还蛋白还原酶1基因;;真核表达载体;;脂蛋白脂肪酶基因;;脂肪酸合成酶基因
基金资助：江苏省自然科学基金项目(BK20191476)
