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作者：彭双婷;许洵锴;曾旭健;王燚;苏灿文;梁晋嘉;林鸿颖;陈秋;包银莉;
单位：龙岩学院;福建农林大学;动物源性人兽共患病防控福建省高校工程研究中心;
摘要：为了高效制备高质量乳酸乳球菌革兰氏阳性菌增强基质(Gram-positive enhancer matrix, GEM)颗粒，试验分别采用0.625%、1.25%、2.50%、5.00%、10.00%的三氯乙酸(TCA)、盐酸(HCl)、乙酸(HAc)、硫酸(H_2SO_4)加热煮沸乳酸乳球菌MG1363的方法制备了GEM颗粒，并检测了GEM颗粒得率、蛋白质去除效果、颗粒完整性，同时测定了TCA制备的GEM颗粒与锚定蛋白(protein anchor, PA)的结合能力。结果表明：TCA与HAc加热煮沸法制备的GEM颗粒平均得率相似，且极显著高于HCl和H_2SO_4(P<0.01),其中5.00%HAc制备的GEM颗粒得率最高，可达99.27%;各浓度(除10%外)HAc、0.625%和1.25%TCA、0.625%HCl及0.625%H_2SO_4制备的GEM颗粒蛋白质去除效果较好；各浓度TCA、HCl、HAc及0.625%H_2SO_4制备的GEM颗粒与未经酸处理的乳酸乳球菌形态相似，而1.25%、2.50%、5.00%、10.00%H_2SO_4制备的颗粒明显圆缩且边缘粗糙；不同浓度TCA制备的GEM颗粒均可与PA结合，且1 U 1.25%TCA制备的GEM颗粒可结合不少于142.86μg的PA。说明低浓度(0.625%、1.25%)的TCA和HCl及5.00%HAc具有更好的提取效果，且1.25%TCA制备的GEM颗粒具有较好的PA结合能力。
关键词：革兰氏阳性菌增强基质颗粒;;得率;;蛋白质去除效率;;颗粒完整性;;结合能力
基金资助：中央引导地方科技发展资金项目(2022L3067);; 福建省自然科学基金项目(2020J05202);; 福建省教育厅中青年教师教育科研项目(JAT190738);; 国家级大学生创新创业训练计划资助项目(202111312021);; 上杭县奇迈科技创新基金项目(2020SHQM13)
