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黑龙江畜牧兽医2025年第02期:黄芩苷通过ROS/MAPK/HIF-1α信号通路颉颃双酚A诱导的鸡巨噬细胞凋亡和程序性坏死

来源:期刊VIP网 时间:


作者:曹舒婷;王天佑;曲丹杨;徐世文;

单位:东北农业大学动物医学学院;

摘要:为了探究黄芩苷(BAI)通过活性氧(ROS)/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)信号通路对双酚A(BPA)诱导的鸡巨噬细胞(HD11)凋亡和程序性坏死的颉颃作用,试验采用不同质量浓度的BPA和/或BAI处理HD11细胞24 h,通过CCK-8法测定BPA对HD11细胞的半数抑制浓度,并筛选出BAI颉颃BPA的最适剂量。将HD11细胞分为对照组(正常培养)、BAI组(加入确定的BAI最适剂量)、BPA组(加入确定的BPA最适剂量)和BAI+BPA组(加入确定的BPA和BAI最适剂量),常规培养24 h后收集细胞,检测细胞凋亡和程序性坏死情况及氧化应激指标,并检测细胞凋亡、程序性坏死和ROS/MAPK/HIF-1α信号通路相关基因和蛋白的表达。结果表明:BPA对HD11细胞的半数抑制浓度为(45.55±0.09)μg/mL,BAI颉颃BPA的最适剂量为0.89μg/mL。与对照组相比,BPA组细胞内ROS相对荧光强度显著增加(P<0.05),而与BPA组相比,BAI组和BPA+BAI组细胞内ROS相对荧光强度显著降低(P<0.05)。与对照组相比,BPA组总抗氧化能力及谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶活性显著降低(P<0.05),而丙二醛含量显著升高(P<0.05);与BPA组相比,BAI组和BPA+BAI组总抗氧化能力及谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶活性显著升高(P<0.05),而丙二醛含量显著降低(P<0.05)。与对照组相比,BPA组ROS/MAPK/HIF-1α信号通路相关因子(JNK、HIF-1α、P38和ERK)表达量显著升高(P<0.05),除了凋亡因子Bcl-2的表达量显著降低(P<0.05)外,其余细胞凋亡相关因子(P53、BAK和Cytc)和程序性坏死相关因子(RIPK1、RIPK3和MLKL)表达量显著升高(P<0.05);而与BPA组相比,BAI组和BPA+BAI组ROS/MAPK/HIF-1α信号通路相关因子(JNK、HIF-1α、P38和ERK)表达量显著降低(P<0.05),除了凋亡因子Bcl-2的表达量显著升高(P<0.05)外,其余细胞凋亡相关因子(P53、BAK和Cytc)和程序性坏死相关因子(RIPK1、RIPK3和MLKL)表达量显著降低(P<0.05)。说明BAI可以通过ROS/MAPK/HIF-1α信号通路颉颃BPA诱导的HD11细胞凋亡和程序性坏死。

关键词:双酚A(BPA);;黄芩苷(BAI);;鸡巨噬细胞(HD11);;细胞凋亡;;程序性坏死;;ROS/MAPK/HIF-1α

基金资助:黑龙江省自然科学基金联合引导项目(LH2023C024)