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作者：文远汐;陈曦;李哲;逄波;付秀萍;樊粉霞;阚飙;
单位：山东大学公共卫生学院;中国疾病预防控制中心传染病预防控制所,传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室;
摘要：目的 研究霍乱弧菌O1群新支系菌株对分型噬菌体的敏感性，探讨菌株对VP3敏感性减弱的分子机制。方法 通过噬菌体裂解实验评价霍乱弧菌O1群新支系菌株对5株分型噬菌体（VP1～VP5）的敏感性；通过噬菌体吸附实验评价VP3与新支系菌株结合的能力；采用序列测定和蛋白空间结构预测分析VP3受体蛋白TolC序列及结构变化；利用细菌双杂交实验定量检测VP3受体结合蛋白Gp44蛋白与TolC蛋白的互作能力。结果 与霍乱第七次大流行代表株N16961相比，霍乱弧菌O1群新支系菌株对分型噬菌体VP1、VP3和VP4敏感性下降，对VP3的吸附能力降低（P<0.01）。VP3受体蛋白TolC在新支系菌株中出现不同于O1群El Tor型大流行菌株的氨基酸突变序列型（TolCVC6050-D283S、TolCVC7132-D283S和TolCVC7131-S281R）。蛋白空间结构预测提示，新序列型TolC蛋白的loop区空间结构发生了改变。VP3的受体结合蛋白Gp44与TolC新序列型蛋白的互作能力显著降低（P<0.001）。结论 霍乱弧菌新支系菌株TolC蛋白氨基酸序列发生改变，使其与VP3的受体结合蛋白Gp44的互作能力显著下降，导致新支系菌株对VP3的敏感性降低。本研究揭示，O1群新支系菌株在环境噬菌体压力下具有生存优势，这对理解霍乱弧菌的遗传多样性和进化特征具有重要意义。
关键词：霍乱弧菌;;进化分支;;噬菌体;;裂解;;受体
基金资助：国家重点研发计划（No.2022YFC2302800,No.2021YFC2300304,No.2022YFC2305300）~~
