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作者:张京燕;张钰苹;谢林惠;周鸿;罗思瑶;罗荧萍;
单位:川北医学院药学院;成都大学药学院;
摘要:设计并构建了一种快速、免标记的p53基因可视化检测方法。当靶标存在时,可激活分析平台的滚环扩增反应而产生长的DNA链,此DNA链能进一步与盐酸小檗碱结合并增强其荧光,从而实现对p53基因的荧光定量分析。本方法具有高灵敏度和高特异性,能有效识别单碱基突变的p53基因,检出限低至5.63 pmol/L,并可在365 nm的紫外光照射下实现裸眼可视化检测分析。利用本方法检测10%胎牛血清样本中的p53基因,加标回收率在99.5%~104.7%之间,相对标准偏差(RSD)为0.1%~1.2%。本方法具有成本低、免标记、快速、灵敏度高、选择性好及抗干扰能力强等优点,可用于复杂生物样本中p53基因的定量分析,在疾病尤其是肿瘤的诊断和治疗中具有良好的应用前景。
关键词:p53基因;;滚环扩增;;免标记;;盐酸小檗碱;;荧光检测
基金资助:国家自然科学基金项目(No.82104116);; 南充市“市校合作”专项科研项目(No.20SXQT0326);; 四川省大学生创新创业项目(No.S202210634069)资助~~