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作者:钟子惠;霍冰洋;夏凌;贺锦灿;李攻科;
单位:广东药科大学公共卫生学院;中山大学化学学院;
摘要:基于分裂适配体的靶标识别能力和分子逻辑门的智能分析能力,将两种分裂适配体整合到“AND”逻辑门中,构建了一种新型邻位核酸荧光传感器,用于凝血酶(Tob)和肌红蛋白(Myo)的同时检测。当仅存在一种目标物时,信号的响应为单一荧光输出信号,可作为早期低风险判断的评价标准;当两种目标物同时存在时,分裂适配体与目标物结合,形成三元复合物,分别导致首尾的邻位核酸效应,同时触发G-四链体增强硫磺素T荧光信号和Cyanine 3的荧光信号猝灭,可作为早期高风险判断的评价标准。在优化条件下,本方法检测Tob的线性范围为3~200 nmol/L,相关系数为0.9931,检出限(LOD)为0.97 nmol/L;检测Myo的线性范围为6~400 nmol/L,相关系数为0.9933, LOD为2.14 nmol/L。将本方法应用于临床血清样本中Tob和Myo的同时测定,加标回收率分别为85.4%~118.3%和85.8%~119.9%,相对标准偏差均小于6.5%。与标准方法的测定结果相比,本方法的相对误差的范围为–8.8%~5.6%。此外,4例血清样品的逻辑诊断结果为急性心肌梗死高风险2例,低风险2例。本研究提出的“AND”逻辑门邻位核酸荧光传感方法具有选择性高、快速、准确和可同时检测等优点,为急性心肌梗死早期诊断提供了重要参考,也为生物标志物的同时检测提供了一种通用性检测设计思路和平台。
关键词:逻辑门;;分裂适配体;;同时检测;;凝血酶;;肌红蛋白
基金资助:国家自然科学基金重点项目(No.22134007);; 广东省自然科学基金项目(No.2024A1515011077)资助~~