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作者：王皓;王永杰;田峰霖;阮述超;田野;李树枫;丁北辰;丁君;韩冰;
单位：大连海洋大学水产与生命学院农业农村部北方海水增养殖重点实验室;
摘要：为探究低温沉默与复苏过程中黄海胆(Glyptocidaris crenularis)(体质量为60～65 g)精子活性的调控机制，采用RNA-Seq技术对低温保存及滴加海水复苏后的黄海胆精子进行了基因转录水平分析。结果表明：每组黄海胆精子进行高通量测序获得5.92～6.99 Gb数据，组装得到113 728条转录本和73 814条Unigene,其中，15 333条Unigene注释到KEGG数据库，归类到290个通路。差异表达基因富集结果显示，低温处理抑制细胞间隙连接通讯、氧化磷酸化等通路；在滴加海水复苏后，碳水化合物分解代谢过程、磷酸戊糖分流、NADPH再生、葡萄糖6-磷酸代谢过程等通路富集的差异表达基因增加。通过荧光定量PCR技术对与精子活性调控相关的差异表达基因Spe-8、Spe-12、Catsper2、NKAa1进行表达水平验证，其中，Spe-8、Spe-12通过参与调控精子的活化促进受精作用，Catsper2参与Ca~(2+)在精子细胞内的传递与运输，NKAa1影响钠钾离子通道中Na~+和K~+的传递，结果显示，以上基因在低温沉默后表达水平显著下调，在海水复苏后表达水平显著提高。本研究为黄海胆精子低温保存及复苏的调控机制研究提供了基础数据和有益参考。
关键词：黄海胆;;精子低温保存;;海水复苏;;转录组分析
基金资助：2023年辽宁省“兴辽人才计划”项目(XLYC2202001);; 2021年辽宁省海洋经济发展项目(辽自然资发〈2022〉47号)
