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作者：魏娜;郭崇元;白敏;安耀荣;张司朝;武李阳;段永强;
单位：甘肃中医药大学甘肃省中药新产品创制工程实验室;甘肃省中医方药挖掘与创新转化重点实验室;宁夏医科大学中医学院;
摘要：目的 从无翅型MMTV整合位点家族成员（Wnt）/β-连环蛋白（β-catenin）通路探讨参芪抑瘤方治疗胃癌前病变（PLGC）的可能作用机制。方法 采用CCK-8法检测胃癌细胞AGS细胞存活率筛选参芪抑瘤方含药血清干预时间及Wnt/β-catenin通路抑制剂XAV939干预浓度。实验将AGS细胞分为胃癌细胞组（15%空白血清）、抑制剂组（筛选浓度的XAV939）、参芪抑瘤方高剂量组（12%参芪抑瘤方含药血清+3%空白血清）、参芪抑瘤方中剂量组（6%参芪抑瘤方含药血清+9%空白血清）、参芪抑瘤方低剂量组（3%参芪抑瘤方含药血清+12%空白血清），每组设3个复孔。分别培养24 h、48 h通过细胞划痕实验检测细胞迁移、侵袭能力；培养筛选干预时间后流式细胞术检测细胞周期，荧光免疫法检测增殖细胞核抗原（Ki67）蛋白水平，蛋白免疫印记法检测Wnt、β-catenin、糖原合成酶激酶3β (GSK-3β)、核内T细胞特异性因子（TCF）蛋白水平，实时荧光定量PCR法检测Wnt、β-catenin、GSK-3β、TCF mRNA表达。结果 筛选出参芪抑瘤方含药血清干预时间为48 h和XAV939干预浓度为20μmol/L用于后续实验。与胃癌细胞组同时间点比较，除24 h参芪抑瘤方低剂量组之外，参芪抑瘤方各剂量组24 h、48 h细胞划痕迁移率均降低（P<0.05）。与参芪抑瘤方低剂量组同时间点比较，参芪抑瘤方高、中剂量组24 h及参芪抑瘤方高剂量组48 h细胞划痕迁移率均降低（P<0.05）。与胃癌细胞组比较，参芪抑瘤方高剂量组和抑制剂组Wnt、β-catenin、TCF蛋白水平及其相应的mRNA表达降低，Ki67蛋白水平及细胞周期S期、G2期比例亦降低，GSK-3β蛋白水平、GSK-3β mRNA表达及G1期比例升高（P<0.05）。与抑制剂组比较，参芪抑瘤方高剂量组G1期比例降低、G2期比例升高（P<0.05），而Wnt、β-catenin蛋白水平其相应的mRNA表达差异无统计学意义（P>0.05）。结论 参芪抑瘤方含药血清可以抑制胃癌细胞AGS的迁移、侵袭能力，将细胞周期阻滞在G1期，其机制可能与调控Wnt/β-catenin通路有关。
关键词：胃癌前病变;;参芪抑瘤方;;胃癌细胞;;细胞迁移;;细胞周期;;无翅型MMTV整合位点家族成员;;β-连环蛋白
基金资助：甘肃省科技计划项目（20JR10RA314）;; 宁夏自然科学基金（2023AAC03170）
