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作者：刘丹;李慧彤;张博源;高建帅;蒋卉;范学政;张广智;郜卫华;丁家波;熊涛;沈青春;
单位：长江大学动物科学技术学院;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业农村部动物生物安全风险预警及防控重点实验室(北方);
摘要：为了研制安全稳定的小反刍兽疫病毒（PPRV）核酸检测质控品，本试验将PPRV检测靶标基因N、MS2噬菌体衣壳蛋白（CP）和成熟酶蛋白A基因序列插入p ET28a构建重组质粒p ET-CPA-PPR，经表达纯化、去除残余核酸和实时荧光定量PCR鉴定后制备成PPRV装甲RNA质控品，并对其进行电子显微镜观察、定量、耐核酸酶检验、均匀性和稳定性检验，以评估其作为标准物质的可能性。结果显示，p ET-CPA-PPR经诱导表达和纯化后形成直径为23～28 nm、大小均一、已包封PPRV检测靶标基因N的装甲RNA颗粒，浓度为2.24×10~(9 )copies/μL，可以有效抵抗核酸酶降解作用，均匀性良好且在（37±1）℃条件下可稳定保存至少30 d。结果表明，基于MS2噬菌体制备的PPRV装甲RNA拷贝数高，均匀性和稳定性良好，能够为PPRV核酸检测提供安全可靠的标准化参考物质。
关键词：小反刍兽疫(PPR);;MS2噬菌体;;装甲RNA;;病毒样颗粒
基金资助：“十四五”国家重点研发计划项目-重大外来动物疫病阻断与防控技术研发项目（2022YFD1800500）
