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作者：王艳萍;王文秀;徐倩倩;王艳;莫玲;苗立中;董林;杨丽梅;郭时金;付石军;田风荣;
单位：山东省滨州畜牧兽医研究院;滨州点石成金技术转移与成果转化服务中心;
摘要：为了开发增强黏膜免疫的CpG寡脱氧核苷酸（CpG-ODN）纳米剂，为减抗和替抗提供支撑。本试验采用多碳纳米管（MWCNT）制备CpG-ODN纳米剂，经肺内途径免疫新生海兰W-36白壳蛋鸡，通过酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清白细胞介素2(IL-2)、干扰素γ(IFN-γ)和肠道分泌型免疫球蛋白A(sIgA)含量，荧光定量逆转录聚合酶链式反应（qRT-PCR）检测白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素8(IL-8)、白细胞介素10(IL-10)、白细胞介素18(IL-18)和Toll样受体21(TLR21)的mRNA转录水平。通过生存率、临床赋值评分和细菌接种评分评价CpG-ODN纳米剂对禽致病性大肠杆菌O_2的攻毒保护效力。结果显示，制备的CpG-ODN纳米剂平均粒径为（72.30±9.54）nm，形态均一。与对照组比较，CpG-ODN组鸡只血清中IL-2和IFN-γ在12和24 h极显著升高（P <0.01）;IL-1β、IL-6、IL-18、IL-4和TLR21mRNA转录水平在12和24 h显著增加（P <0.05或P <0.01）;IL-10 mRNA转录水平在6 h极显著增加（P <0.01）,12 h显著增加（P <0.05）；肠道sIgA在12和24 h显著升高（P <0.05），在48 h极显著升高（P <0.01）。与攻毒对照组相比，CpG-ODN组和抗生素组鸡只生存率均显著升高（P <0.05），临床赋值评分和细菌接种评分均显著降低（P <0.05）。结果表明，肺内给予CpG-ODN纳米剂可激活黏膜免疫反应，有效保护禽致病性大肠杆菌O_2对试验鸡只的攻击，明显减轻临床症状并降低死亡率，显示良好的减抗和替抗前景。
关键词：CpG寡脱氧核苷酸(CpG-ODN);;纳米剂;;黏膜免疫;;禽大肠杆菌;;攻毒保护
基金资助：山东省自然科学基金项目（ZR2023MC212,ZR2022MC173）;; 滨州市农社领域科技创新政策引导计划项目（2022KTPY027）
