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作者：宁宇春;王圆赫;郭祥杰;朱宏阳;田万年;
单位：吉林农业科技学院动物科技学院;图们市凉水镇畜牧兽医站;
摘要：为建立一种能快速对羊泰勒虫（ovine and caprine theileria）和嗜吞噬细胞无浆体（A. phagocytoph-ilum）同时进行检测的双重PCR方法。根据GenBank已报道的羊泰勒虫MPSP基因和羊嗜吞噬细胞无浆体16S rRNA基因设计合成了2对特异性引物，通过条件优化，建立了双重PCR检测方法。双重PCR可特异扩增出羊泰勒虫和嗜吞噬细胞无浆体目的条带，片段大小分别为875bp和394bp。该方法具有较好的特异性，对羊泰勒虫和嗜吞噬细胞无浆体的最低检出浓度为16fg/μL和1fg/μL。对采集的60份血液样本进行双重PCR检测，羊泰勒虫阳性率为46.67%(28/60)，嗜吞噬细胞无浆体阳性率为13.33%(8/60)，混合感染率为10%(6/60)。结果表明，双重PCR方法可用于羊泰勒虫和嗜吞噬细胞无浆体的快速诊断和流行病学调查。
关键词：双重PCR;;羊泰勒虫;;嗜吞噬细胞无浆体;;主要表面蛋白;;16S rRNA
基金资助：吉林农业科技学院大学生创新创业训练计划项目（202111439018）
