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作者：曲信芹;魏波;徐丽丽;刁治君;韩成昊;蔡青秀;丛雁方;马爱琴;
单位：青岛蔚蓝生物股份有限公司;青岛动保国家工程技术研究中心有限公司;青岛蔚蓝生物制品有限公司;
摘要：构建针对伪狂犬病病毒gE和gI基因缺失的重组转移质粒pBL-gI-gE，将PRV-CY-?gI/gE-GFP病毒、pBL-gI-gE转移载体和Lipofectamin 2000转染试剂共转染BHK-21细胞，蚀斑筛选纯化法得到重组病毒PRV-CY-?gI/gE，命名为CY-6株。将CY-6株C1代在BHK-21细胞增殖并传至10代，测定生长曲线、病毒含量、基因鉴定、特异性、纯净、毒力和免疫原性。结果CY-6株的生长曲线与亲本CY株无明显变化，C1～C10代毒的病毒含量为10~(8.17)～10~(8.68) TCID50/mL，基因鉴定显示gE基因无366 bp的目的条带，gD基因有1条217 bp的目的条带，gI基因无331 bp的目的条带，特异性检验显示均能被伪狂犬病病毒特异性阳性血清中和；纯净检验该毒种无菌、支原体及外源病毒污染；毒力试验试验猪均5/5健活，免疫原性试验免疫组5/5保护，CY株攻毒对照组5/5发病，其中3/5死亡。以上结果表明伪狂犬病病毒CY-6株符合生产用毒种的初步要求，为研制新型伪狂犬病病毒基因缺失灭活疫苗奠定基础。
关键词：伪狂犬病病毒;;基因缺失;;免疫效力
基金资助：山东省重点研发计划(泰山产业领军人才工程高效生态农业创新类)(LJNY202009);; 青岛市科技惠民示范引导专项(20-3-4-21-nsh)
