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作者：解艺璇;张彦兵;李慧;朱琳;葛菲菲;刘珂;魏建超;李宗杰;邵东华;李蓓蓓;马志永;孙延鸣;邱亚峰;
单位：石河子大学动物科技学院;中国农业科学院上海兽医研究所;上海市动物疫病预防控制中心;
摘要：本研究尝试利用PRRSV Nsp1α合成肽进行多克隆抗体的制备，并对抗体的特性进行了分析。首先，利用生物信息学技术预测获得PRRSV非结构蛋白Nsp1α的抗原肽序列；随后，按照此序列合成获得抗原肽，并将其与KLH载体蛋白进行偶联；接下来，将偶联好的抗原肽与弗氏佐剂混合，通过免疫大白兔制备针对Nsp1α合成肽的多克隆抗体；最后，利用ELISA、Western blot及间接免疫荧光法对多克隆抗体的特性进行了分析。结果显示：该多克隆抗体ELISA的效价超过10~5；利用Western blot可以检测到特异的Nsp1α表达条带，包括瞬时转染的样品和不同毒株病毒感染的样品；利用间接免疫荧光法分析，该多克隆抗体可有效地区分病毒感染和未感染的样品。结果表明，PRRSV Nsp1α合成肽多克隆抗体可以有效地应用于PRRSV Nsp1α表达检测，为进一步研究PRRSV Nsp1α的功能提供了一个有效的工具。
关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒;;合成肽;;多克隆抗体;;非结构蛋白
基金资助：上海市自然科学基金(22ZR1475900);; 中央级公益性科研院所基本科研业务费(2020JB04);; 上海市科技兴农项目(沪农科推字(2020)第1-4号)
