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作者:田瑶;李琛;杨莹;李佳昕;王硕;时建立;彭喆;徐绍建;吴晓燕;刘畅;韩红;韩先杰;李俊;
单位:青岛农业大学动物医学院;山东省农业科学院畜牧兽医研究所;山东师范大学生命科学院;
摘要:为建立塞内卡病毒(SVA)的快速检测方法,本研究在SVA高度保守区域,分别设计了5对特异性LAMP引物,并通过反应条件优化、敏感性试验、特异性试验以及临床样本检测,建立了一种经济、特异、敏感的SVA检测方法。在62℃水浴55 min扩增出大于220 bp的特异性阶梯状条带,以质粒为模板进行敏感性试验结果表明该方法在5.1 copies/μL时仍可以检测出SVA,比普通PCR敏感1000倍。特异性试验结果显示该方法与猪肺炎支原体(MPH)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪圆环病毒3型(PCV3)、猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合增病毒(PRRSV)均无交叉反应,应用该方法检测72例临床疑似病料,阳性率为33%(24例)。与普通PCR相比较,该方法操作简便、快速、特异、经济,本研究提供了一种更适于临床检测的SVA检测方法。
关键词:塞内卡病毒;;环介导等温扩增;;快速检测
基金资助:山东省重大科技创新工程(2023CXGC010705);; 山东省现代农业产业技术体系(SDAIT-08-06);; 山东省科技型中小企业创新能力提升工程(2023TSGC0734);; 国家自然基金(32302911);; 山东省自然基金(ZR2022MC011);; 济南市“新高校20条”(202228112);; 山东省农业科学院科技创新工程(CXGC2018E10)