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中国动物传染病学报2024年第03期:猪弓形虫病阻断ELISA方法的建立及初步应用

来源:期刊VIP网 时间:


作者:潘珂;张静;莫心宇;申邦;方瑞;胡敏;赵俊龙;周艳琴;

单位:华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室;湖北省预防兽医学重点实验室;

摘要:本研究利用制备的GRA7单克隆抗体为基础建立猪弓形虫病的阻断ELISA方法。以rGRA7重组蛋白免疫小鼠,取脾细胞进行细胞融合,筛选出4株能够稳定产生单克隆抗体的阳性单克隆细胞株。经对此单克隆抗体进行IFA和Western blot检测确认成功制备GRA7蛋白的单克隆抗体后,以重组蛋白为包被抗原对阻断ELISA方法进行优化后,经过重复性、交叉性、符合性实验验证本方法具有可重复性,与MAT符合性高。初步应用于288份临床样品检测,检出率为11.46%,与MAT检测结果重合率为84.8%。本研究成功制备弓形虫GRA7蛋白的单克隆抗体,并建立了一种猪弓形虫病的阻断ELISA方法,为弓形虫病的检测提出了新的方案。

关键词:弓形虫;;GRA7蛋白;;单克隆抗体;;阻断ELISA

基金资助:国家重点研发计划(政府间国际科技创新合作专项)(2022YFE0114400)