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中国测试2025年第07期:刺槐蜂蜜的高特异性PCR检测技术体系的建立

来源:期刊VIP网 时间:


作者:李秉成;张宏;殷珍吉;王亚杰;王玉贤;陶向;

单位:四川省产品质量监督检验检测院;成都市产品质量监督检验研究院;成都产品质量检验研究院有限责任公司;四川师范大学生命科学学院;

摘要:蜂蜜富含多种营养物质,深受人们喜爱。中国是全球最大的蜂蜜生产和消费国,随着蜂蜜的需求量加大,大量掺假蜂蜜流入市场。现有的蜜源植物核酸检测技术体系多因检测靶标特异性不足而难以区分蜜源植物的近缘种。本该研究基于生物信息学方法,将刺槐高通量测序数据与近缘种基因组及NCBI的NT核酸数据库比对,成功挖掘到1条3 141 bp的刺槐基因组特异的DNA片段。基于该DNA片段设计PCR扩增引物对RpsF1/RpsR1,扩增长度257 bp。经扩增条件优化,建立一套刺槐蜂蜜定性检测的PCR技术体系,该体系能有效区分刺桐等豆科近缘种,20μL检测体系中可检测出的最低模板量为8.55 ag,对应的DNA模板拷贝数为2.0 copies。以该体系对20份市售槐花蜂蜜进行检测,阳性检出率100.0%。因此,该文建立一套特异性高、灵敏度高的刺槐蜂蜜PCR检测技术体系,为真假蜂蜜的鉴别乃至整顿蜂蜜行业乱象提供了新的技术选择。

关键词:蜂蜜;刺槐;特异DNA片段;PCR;检测体系

基金资助:四川省市场监督管理局科技计划项目(SCSJZ2023004)