来源：期刊VIP网 时间：
作者：谢世斌;郑辉;沙洲;房琳琳;尼博;张慧;董雅琴;魏荣;崔进;
单位：青岛农业大学兽医学院;中国动物卫生与流行病学中心;农业农村部动物生物安全风险预警及防控重点实验室(南方);
摘要：本研究旨在建立更加灵敏的牛轮状病毒（Bovine rotavirus,BRV）检测方法，为BRV的病原学调查及畜牧养殖行业疫病防控提供更加准确和灵敏的技术支持。根据BRV VP6基因组序列，利用Oligo7.56软件设计并合成特异性引物与探针，通过优化反应条件，建立检测BRV的微滴式数字RT-PCR方法，同时开展特异性、敏感性和重复性试验，并将建立的方法应用于14份临床样品的检测。结果表明，本研究所建方法的最低检测限为1.83 copies/μL，具有良好的可重复性，与牛传染性鼻气管炎病毒、牛病毒性腹泻病毒、牛冠状病毒、牛呼吸道合胞体病毒和牛副流感病毒3型均无交叉反应。对14份临床样品进行检测，共检测出4份阳性样品，阳性率为28.57%，检测结果与实时荧光定量RT-PCR检测结果的符合率为100.00%。综上说明，本研究建立的BRV微滴式数字RT-PCR检测方法具有良好的特异性、敏感性和重复性，可应用于临床样本的检测，为BRV的诊断和流行病学调查提供了技术支持。
关键词：牛轮状病毒;;VP6基因;;微滴式数字RT-PCR
基金资助：“十四五”国家重点研发计划项目（2021YFD1800300）
