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作者：李鹏;李嘉豪;张春洋;宋书意;曹又文;王米拉;温墩;储蕊;单衍可;刘斐;
单位：南京农业大学动物医学院单分子生物化学与生物医学实验室;江苏省农业科学院兽医研究所;南京农业大学动物科技学院;
摘要：旨在建立一种现场快速同时检测猪尿液中沙丁胺醇、盐酸克仑特罗和莱克多巴胺残留的瘦肉精三联侧流免疫层析方法。采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金溶液，并优化免疫探针制备过程中偶联溶液的pH值和检测抗体添加量，以制备瘦肉精胶体金免疫层析三联检测卡，并对三联检测卡的检测限、特异性、加速稳定性、重复性及检测临床样本的准确性进行评价。结果：成功制备了3种胶体金免疫探针，所建立的方法对沙丁胺醇、盐酸克仑特罗和莱克多巴胺的检测限分别为3、3和1 ng/mL;测试西马特罗、硫酸特布他林和苯乙醇胺A等常见瘦肉精加标样本时均未发生交叉反应。此外，三联检测卡在37℃加速老化4周后稳定性优良，且批内重复性和批间重复性均良好，未出现假阳性和假阴性反应。临床样本检测结果表明，该方法与液相色谱-质谱联用方法的检测结果一致。综上，本研究建立的瘦肉精胶体金免疫层析三联检测卡灵敏度和特异性高，操作简便，检测时间短且稳定性良好，适用于猪尿液中沙丁胺醇、盐酸克仑特罗和莱克多巴胺的现场快速检测。
关键词：沙丁胺醇;;盐酸克仑特罗;;莱克多巴胺;;猪尿液;;免疫层析;;现场检测
基金资助：南京农业大学新进博士科研启动项目(804006)
