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作者：焦文强;徐引弟;邢广旭;王方雨;赵攀登;郭振华;张家庆;李栋梁;张立宪;黄慧敏;白红杰;雷亚楠;
单位：河南省农业科学院畜牧研究所;河南省农业科学院动物疫病防控研究所;河南牧业经济学院动物医药学院;河南农业大学动物医学院;
摘要：旨在研究豌豆活性肽对猪流行性腹泻病毒(PEDV)复制的体外抑制作用。合成豌豆活性肽KYGPTPVRDGFK,采用CCK-8试验测定该豌豆活性肽在12.5、25、50、100、200μmol/L浓度下对Vero细胞的毒性，将只含DMEM培养基、不含Vero细胞的样品设置为空白对照组，将含DMEM培养基和Vero细胞的样品设置为未添加豌豆活性肽组，将含有Vero细胞和豌豆活性肽的样品设置为添加豌豆活性肽组，通过病毒拷贝数、Western blot、半数组织培养感染量(TCID_(50))测定该豌豆活性肽对PEDV在Vero细胞中复制的抑制作用，进一步采用Western blot分析该豌豆活性肽对PEDV生命周期的作用。结果：与对照组相比，该豌豆活性肽在12.5～200μmol/L浓度范围内对Vero细胞活性无显著性影响(P>0.05);200μmol/L豌豆活性肽处理Vero细胞后，PEDV感染细胞病毒拷贝数、N蛋白灰度值和TCID_(50)值均显著低于对照组(P<0.05);Western blot分析表明，该豌豆活性肽可以促进PEDV吸附和入侵到Vero细胞(P<0.05),而抑制作用主要发生在病毒复制阶段(P<0.05),对于病毒释放无显著作用。Western blot分析表明，该活性肽主要通过抑制内质网氧化还原酶(ERO1a)表达抑制PEDV复制。本研究为新型抗PEDV小分子的研制提供了思路。
关键词：豌豆活性肽;;抗病毒;;吸附;;入侵;;复制
基金资助：国家自然科学基金项目(32202826);; 河南省科技攻关项目(242102110036);; 河南省农业科学院自主创新项目(2024ZC130,2025ZC71)
