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作者：张梦停;王跃帅;张晓晓;李梦娟;胡星星;刘元俊;夏平安;
单位：河南农业大学动物医学院;中农华大检测科技有限公司;动物疫病预防控制和检疫中心;
摘要：旨在对采集的疑似猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)的临床病料进行病毒分离鉴定，并进行基因序列分析与致病性研究。针对猪场采集的疑似PRRS的病料，运用逆转录PCR(RT-PCR)技术进行检测，将检测为阳性的病料接种于非洲绿猴胚胎肾细胞(Marc-145)进行病毒分离，并采用间接免疫荧光(IFA)法进行鉴定；同时，对分离毒株的全基因组进行扩增与序列分析，进而通过感染仔猪探究其致病性。结果：经RT-PCR检测，临床病料猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)呈阳性，接种至Marc-145细胞后出现稳定的细胞病变；IFA试验呈现特异性荧光，表明成功分离到1株病毒，命名为LY30;测序结果显示，该病毒基因组全长为15 216 nt(不含polyA尾),与PRRSV MLV疫苗株、VR2332经典毒株核酸同源性分别达99.6%和99.3%,属于PRRSV MLV疫苗样毒株；将分离毒株LY30感染仔猪后，仔猪出现发热、咳嗽和食欲下降等临床症状，并伴有病毒血症和肺部组织病变，表明分离毒株LY30具有一定的致病性。综上，本研究从临床病料中分离到具有一定致病性的PRRSV MLV疫苗样毒株，对监测弱毒疫苗株临床使用的安全性及PRRS的防控具有重要意义。
关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒;;分离鉴定;;间接免疫荧光;;基因组特征;;弱毒疫苗
基金资助：河南省重点研发与推广专项(科技攻关)(232102110118)
