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作者：张锐;李天玉;刘敬萱;刘冉冉;黄学超;默倩;雷国伍;贾春生;潘丽佳;
单位：河北中医药大学针灸推拿学院;河北省刺灸法效应特异性重点研究室;
摘要：目的：观察麦粒灸联合化疗对乳腺癌小鼠肿瘤生长的抑制作用，并探讨其机制。方法：将40只雌性BALB/c小鼠随机分为空白组、模型组、化疗组、麦粒灸组、化疗加麦粒灸组，每组8只。将4T1细胞悬液（0.1 mL）注射到小鼠右侧第4乳头的皮下脂肪垫中建立乳腺癌模型。造模成功后化疗组腹腔注射阿霉素2.5 mg/kg，每周2次，共3周；麦粒灸组于“神阙”和双侧“足三里”行麦粒灸，隔天1次，共21 d；化疗加麦粒灸组同时给予阿霉素和麦粒灸治疗，共21 d。记录小鼠干预前后体质量和肿瘤体积，干预后测量肿瘤质量，HE染色法观察肿瘤病理形态变化，TUNEL法检测肿瘤组织细胞凋亡情况，Western blot法测定肿瘤组织磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）、蛋白激酶B(AKT)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）、磷酸化（p）-PI3K、p-AKT、p-mTOR、半胱天冬蛋白酶-3(Caspase-3)、Cleaved Caspase-3、半胱天冬蛋白酶-9(Caspase-9)、Cleaved Caspase-9蛋白的表达水平。结果：干预后与模型组比较，化疗组小鼠体质量下降（P<0.05），化疗组、麦粒灸组、化疗加麦粒灸组肿瘤质量、肿瘤体积及肿瘤组织中p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR的比值下降（P<0.05），肿瘤组织中凋亡细胞率及Caspase-3、Cleaved Caspase-3、Caspase-9、Cleaved Caspase-9蛋白表达水平上升（P<0.05）。化疗加麦粒灸组肿瘤质量、肿瘤体积及肿瘤组织p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR比值较麦粒灸组、化疗组下降（P<0.05），凋亡细胞率及Caspase-3、Cleaved Caspase-3蛋白表达水平较麦粒灸组、化疗组上升（P<0.05）,Caspase-9、Cleaved Caspase-9蛋白表达水平较麦粒灸组上升（P<0.05）。与麦粒灸组比较，化疗组肿瘤体质量、肿瘤体积及肿瘤组织中p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR的比值下降（P<0.05），肿瘤组织中凋亡细胞率及Caspase-3、Caspase-9、Cleaved Caspase-9蛋白表达水平上升（P<0.05）。HE染色结果显示，模型组肿瘤细胞呈弥漫性生长，排列密集；化疗、化疗加麦粒灸组肿瘤组织胞质、细胞核淡染，核分裂减少、核碎片减少、密度变小，肿瘤细胞坏死程度按艾灸组、化疗组、化疗加麦粒灸组依次增加。结论：麦粒灸联合化疗、麦粒灸均能明显抑制乳腺癌小鼠肿瘤的生长，其机制可能与抑制肿瘤组织中PI3K/AKT/mTOR信号通路相关蛋白活性，进而上调凋亡相关蛋白Caspase-3、Caspase-9表达有关。
关键词：乳腺癌;;麦粒灸;;化疗;;PI3K/AKT/mTOR信号通路;;半胱天冬蛋白酶-3;;半胱天冬蛋白酶-9
基金资助：河北省自然科学基金项目(No.H2023423029)
