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作者:富昱;董宝强;林星星;盛泽伟;田昀昊;王垒钞;
单位:辽宁中医药大学针灸推拿学院;辽宁中医药大学附属医院;
摘要:目的:观察经筋刺法对膝关节骨关节炎(KOA)大鼠骨骼肌生肌标志物、炎性因子及Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路蛋白的影响,探讨其可能的作用机制。方法:雄性SD大鼠随机分成空白组、模型组、经筋刺组,每组10只。采用膝关节制动法制备KOA模型。经筋刺组针刺右后肢股前侧的股直肌肌腱抵止处,腹股沟部的股直肌肌腱抵止处,以及臀后侧半腱肌和股二头肌长头之间当坐骨结节处软组织的拘挛、结节处,20 min/次,1次/d,共14 d。步态分析技术观察经筋刺法对各组大鼠行为学的影响,HE染色法观察各组大鼠膝关节软骨及骨骼肌形态结构,ELISA法检测各组大鼠骨骼肌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)含量,实时荧光定量PCR法检测各组大鼠骨骼肌配对核转录因子7(Pax7)、成肌分化抗原(MyoD)、肌细胞生成素(MyoG)、肌球蛋白重链-Ⅰ(MyHC1)mRNA表达水平,Western blot法检测各组大鼠骨骼肌β-catenin、糖原合成酶激酶3β(GSK3β)、磷酸化(p)-β-catenin、G1/S-特异性周期蛋白-D1(CyclinD1)蛋白表达水平。结果:模型组大鼠膝关节软骨及肌纤维受损,肌纤维和软骨细胞排列明显紊乱,可见炎性细胞浸润;经筋刺组肌纤维结构较完整,肌纤维排列较整齐,可见再生的肌纤维。针刺干预后,与空白组比较,模型组大鼠右后肢爪印面积、最大压强、肌湿重、湿重比率、围度降低(P<0.01,P<0.05);骨骼肌IL-1β、TNF-α含量升高(P<0.01);骨骼肌Pax7、MyoD、MyoG mRNA表达水平升高(P<0.01),MyHC1mRNA表达水平降低(P<0.01);骨骼肌β-catenin、CyclinD1蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01),GSK3β、p-β-catenin蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,经筋刺组大鼠右后肢爪印面积、最大压强、肌湿重、湿重比率、围度升高(P<0.01);骨骼肌IL-1β、TNF-α含量降低(P<0.01,P<0.05);骨骼肌Pax7、MyoD、MyoG、MyHC1 mRNA表达水平升高(P<0.01);骨骼肌β-catenin、CyclinD1蛋白表达升高(P<0.01),GSK3β、p-β-catenin蛋白表达降低(P<0.01)。结论:经筋刺法可促进KOA大鼠骨骼肌卫星细胞增殖、分化,并通过上调Wnt/β-catenin信号途径发挥促卫星细胞再生修复的作用。
关键词:膝关节骨关节炎;;经筋;;针刺;;卫星细胞;;生肌标志物;;炎性因子;;β-连环蛋白
基金资助:国家自然科学基金项目(No.81574050);; 辽宁省自然科学基金计划项目(No.2022-BS-196、2022-NLTS-13-04)