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作者:骆敏;曲正阳;李桐;刘筱羽;李雅静;宿杨帅;景向红;
单位:中国中医科学院针灸研究所;
摘要:目的:观察电针双侧“天枢”对溃疡性结肠炎(UC)小鼠的抗炎效应特点,从结肠相关交感节后、骶副交感节后神经元水平,进一步探索参与该效应可能的神经环路。方法:将30只C57BL/6J雄性小鼠随机分为正常组、模型组、电针组,10只/组。给予模型组与电针组小鼠3%葡聚糖硫酸钠(DSS)溶液自由饮用7 d制备UC模型。电针组在异氟烷吸入麻醉状态下,于造模第1、3、5、7天各进行1次2 mA电针双侧“天枢”干预,频率10 Hz,30 min/次。通过评估各组小鼠的体质量变化和结肠HE染色情况判断结肠炎性反应程度和电针效应;通过高效液相色谱-质谱联用技术检测各组小鼠远端结肠组织中乙酰胆碱(ACh)、去甲肾上腺素(NE)相对丰度值。此外,将6只C57BL/6J雄性小鼠随机分为模型组、电针组,3只/组。在DSS造模第5天,电针组小鼠给予1次电针“天枢”干预(参数同上),模型组仅麻醉不电针。采用免疫荧光染色法观察肠系膜上、下神经节(SMG、IMG)中酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经元、盆神经节(PG)中囊泡乙酰胆碱转运蛋白(VAChT)阳性神经元c-Fos蛋白表达情况。结果:DSS造模第7~9天,与正常组相比,模型组小鼠体质量显著下降(P<0.001);与模型组相比,电针组小鼠体质量下降的幅度明显减小(P<0.01,P<0.05)。与正常组相比,模型组小鼠结肠黏膜结构破坏,组织水肿与炎性浸润明显,结肠的病理损伤评分显著升高(P<0.000 1);与模型组相比,电针组小鼠结肠的病理损伤评分显著降低(P<0.001)。与正常组比较,模型组远端结肠ACh相对丰度显著下降(P<0.05);与模型组比较,电针组远端结肠ACh相对丰度值显著升高(P<0.05);3组间NE相对丰度值差异无统计学意义。免疫荧光染色结果表明,模型组和电针组小鼠交感节后SMG、IMG中TH~+神经元均未见明显c-Fos表达;但与模型组相比,电针组PG中表达c-Fos的VAChT~+神经元数量显著增多(P<0.05)。结论:电针双侧“天枢”能改善UC小鼠的炎性反应,该效应可能与电针激活PG中的骶副交感节后神经元相关,但可能不依赖于相关交感节后神经成分。
关键词:电针;;天枢;;溃疡性结肠炎;;神经免疫调控;;盆神经节
基金资助:国家自然科学基金项目(No.82274245);; 中国中医科学院优秀青年科技人才(创新类)培养专项(No.ZZ13-YQ-069);中国中医科学院针灸研究所创新人才专项(No.ZZ-JQ2023001)