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作者：杨骐瑞;仇兴华;戴兴业;刘道楠;赵百川;江文艺;宋燕华;蒲通;程凯;
单位：北京中医药大学针灸推拿学院;
摘要：目的：探讨电针“内关”对心肌缺血再灌注损伤（MIRI）大鼠不同时期（缺血期、再灌注期）线粒体自噬的调控作用，探讨电针“内关”的双向调控作用及可能机制。方法：将45只雄性SD大鼠按照随机数字表法分为6组，假手术组（9只）、模型A组（6只）、模型B组（9只）、电针A1组（6只）、电针B1组（6只）、电针B2组（9只）。除假手术组外，其余各组大鼠采用物理结扎加推管法复制MIRI模型，模型A组进行结扎后直接取材，模型B组进行结扎、再灌注后取材；电针A1组结扎的同时进行电针处理，之后直接取材；电针B1组结扎的同时进行电针处理，再灌注后取材；电针B2组结扎、开放冠状动脉左前降支的同时予电针处理，再灌注后取材。电针取双侧“内关”，采用疏密波，频率2 Hz/100 Hz，电流1 mA，时长为30 min。HE染色法观察大鼠心肌细胞形态，TUNEL法检测大鼠心肌细胞凋亡情况，转录组测序检测大鼠左心室差异表达基因，JC-1流式法检测大鼠心肌细胞线粒体膜电位（MMP）,Western blot法检测大鼠左心室磷酸酶和张力蛋白同源物诱导激酶1(Pink1)、Parkin和p62蛋白表达，ELISA法检测大鼠血清肌酸激酶同工酶（CK-MB）、心肌肌钙蛋白I(cTn-I)含量。结果：与假手术组比较，模型B组大鼠心肌细胞损伤严重，排列紊乱，边界不清，肌纤维断裂，细胞水肿、松散；电针B2组大鼠心肌细胞损伤轻微，细胞结构部分不清，细胞排列较规则，可见完整心肌细胞。与假手术组比较，模型B组大鼠心肌细胞凋亡加重（P<0.001）；与模型B组比较，电针B2组心肌细胞凋亡减轻（P<0.001）。电针B2组、假手术组和模型B组之间的差异表达基因与细胞自噬和线粒体自噬密切相关。与假手术组比较，模型B组大鼠心肌细胞MMP降低（P<0.001），左心室Pink1、Parkin、p62蛋白表达和血清CK-MB、cTn-I含量升高（P<0.001）；与模型A组比较，电针A1组心肌细胞MMP和血清CK-MB、cTn-I含量降低（P<0.001,P<0.05），左心室Pink1蛋白表达升高（P<0.01）；与模型B组比较，电针B1组和电针B2组心肌细胞MMP升高（P<0.001），左心室Pink1、Parkin、p62蛋白表达及血清CK-MB、cTn-I含量降低（P<0.001）；与电针A1组比较，电针B1组心肌细胞MMP升高（P<0.001），左心室Pink1、Parkin、p62蛋白表达及血清CK-MB、cTn-I含量降低（P<0.01）。结论：电针“内关”能改善大鼠MIRI，其机制可能通过Pink1/Parkin介导的线粒体自噬通路实现，在缺血期可以增强线粒体自噬来减轻心肌损伤，在再灌注期可以降低线粒体自噬来减轻再灌注损伤。
关键词：心肌缺血再灌注损伤;;电针;;内关;;线粒体自噬;;双向调节
基金资助：北京中医药大学揭榜挂帅资助项目：90011431210003
