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作者：舒治钧;徐义鹏;张全怡;蔡定均;赵征宇;
单位：成都中医药大学针灸推拿学院;
摘要：目的：探索α7-nAChR在针刺调节失眠大鼠丘脑网状核（TRN）内神经元活性及神经元上突触相关蛋白表达中的作用。方法：将36只清洁级雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、针刺组、针刺+拮抗剂组，各9只。模型组、针刺组、针刺+拮抗剂组采用腹腔注射对氯苯丙氨酸（PCPA）法制备失眠大鼠模型。造模成功后，针刺组、针刺+拮抗剂组予针刺双侧“内关”“足三里”，每日1次，连续5 d；每次针刺干预前30 min，针刺+拮抗剂组予腹腔注射α7-nAChR拮抗剂甲基牛扁亭柠檬酸盐（MLA）溶液（5 mg/kg），针刺组予腹腔注射等量0.9%氯化钠溶液。观察大鼠日间自发活动量，采用神经电生理检测大鼠TRN内神经元放电情况，免疫荧光染色法检测TRN内小清蛋白（PV）~+神经元及PV~+/突触后致密蛋白-95(PSD-95)表达。结果：与对照组比较，模型组大鼠日间自发活动量增加（P<0.01）,TRN内PV~+神经元平均荧光强度降低、阳性细胞数减少（P<0.01）;TRN内神经元放电频率降低（P<0.01），放电间隔时间增加（P<0.01）;TRN内PV~+/PSD-95共标阳性细胞数减少（P<0.01）。与模型组比较，针刺组大鼠日间自发活动量减少（P<0.01）;TRN内PV~+神经元平均荧光强度升高、阳性细胞数增多（P<0.01）;TRN内神经元放电频率升高（P<0.01），放电间隔时间缩短（P<0.01）;TRN内PV~+/PSD-95共标阳性细胞数增加（P<0.05）。与针刺组比较，针刺+拮抗剂组大鼠日间自发活动量增加（P<0.01）;TRN内PV~+神经元平均荧光强度降低、阳性细胞数减少（P<0.01）;TRN内神经元放电频率降低（P<0.05），放电间隔时间增长（P<0.05）;TRN内PV~+/PSD-95共标阳性细胞数减少（P<0.01）。结论：α7-nAChR参与介导针刺对PCPA所致失眠大鼠昼夜节律紊乱的调节，拮抗α7-nAChR可影响针刺对TRN内神经元的激活作用，并降低GABA能神经元上PSD-95蛋白表达。
关键词：失眠;;针刺;;丘脑网状核;;α7烟碱型乙酰胆碱受体;;γ-氨基丁酸能神经元;;突触后致密蛋白-95
基金资助：国家自然科学基金资助项目：82274659、81774434;; 四川省科技厅项目：2021YJ0177、2019YJ0330;; 成都中医药大学杏林学者青基进阶人才专项：QJJJ2021005
