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作者:孙燕;王思亚;张蕾;张立涛;任强;
单位:山东第二医科大学药学院;济宁医学院药学院;济宁医学院生物科学学院;
摘要:通过细胞实验探讨了穗花杉双黄酮(AMF)对人体胰腺癌细胞(Panc-1)活力、增殖和迁移的影响,探索了AMF在胰腺癌治疗中的潜在作用,探讨了其与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用机制。采用超敏型细胞增殖检测(CCK8)、EdU细胞增殖检测(EdU)、细胞划痕实验观察AMF对Panc-1细胞的影响;采用荧光光谱、圆二色光谱及分子对接等方法研究了AMF对BSA光谱性质的影响及相互作用。结果表明:AMF通过静态猝灭与BSA形成复合物,能够自发地与BSA的1个位点结合。随着温度上升,AMF与BSA的结合常数(Ka)下降,表明AMF-BSA复合物稳定性受温度影响。热力学参数与分子对接表明,AMF与BSA的主要相互作用力为疏水作用和氢键作用。同步荧光光谱表明,酪氨酸(Tyr)和色氨酸(Trp)的最大发射峰没有发生明显的位移,氨基酸残基微环境没有发生改变。位点竞争实验表明,AMF与BSA的结合位点在接近Trp残基位点处。圆二色光谱显示α-螺旋含量下降,说明AMF的加入会影响BSA的二级结构。这些结果为AMF与蛋白质之间的分子相互作用以及AMF体外实验提供了参考。
关键词:穗花杉双黄酮;;牛血清白蛋白;;多光谱实验;;相互作用;;细胞实验
基金资助:山东省自然科学基金面上项目(ZR2022MH176)资助