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作者：侯艾琳;余文熙;陈琛;刘宇轩;吉星;吴婵;史大卓;张莹;
单位：中国中医科学院西苑医院;北京中医药大学研究生院;
摘要：目的 基于蛋白质组学技术探究活血温胆方治疗心房颤动（房颤）痰热瘀阻证的可能作用机制。方法 将40只SD大鼠随机分为空白组、模型组、活血温胆方组和抑制剂组，每组10只，抑制剂组用于后续实验验证。除空白组外，其余各组大鼠采用乙酰胆碱氯化钙混合溶液尾静脉注射+高脂饮食+脂多糖腹腔注射的方法建立房颤痰热瘀阻证大鼠模型。实验一：造模成功后活血温胆方组予活血温胆方12.6 g/（kg·d）灌胃，空白组、模型组给予12.6 g/（kg·d）的灭菌饮用水，均每日1次，持续2周。比较空白组、模型组、活血温胆方组大鼠体质量、肛温、舌象RGB值；心电图观察房颤诱发及持续时间；心脏超声检测左心房大小（LA）、主动脉内径（AO）、射血分数（EF）、缩短分数（FS）；左心房组织进行HE染色、Masson染色（心肌胶原容积分数）和天狼星红染色[Ⅰ型胶原（CollagenⅠ）/Ⅲ型胶原（CollagenⅢ）]；肝脏左外叶组织进行HE染色和油红O染色（肝脏脂滴面积）；血液生化指标包括总胆固醇（TC）、低密度胆固醇（LDL-C）、全血黏度（低切、中切、高切）、血浆黏度、红细胞沉降率及凝血指标凝血酶时间（TT）、活化部分凝血酶原时间（APTT）、凝血酶原时间（PT）、纤维蛋白原（FIB）;ELISA法检测炎症因子[包括C反应蛋白（CRP）、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-17(IL-17)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]及纤维化因子[包括基质金属蛋白酶9(MMP9)、CollagenⅠ、半乳糖凝集素3(Gal-3)、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）]水平；心脏组织进行非数据依赖性采集蛋白质组学研究。实验二：根据蛋白质组学研究结果，抑制剂组大鼠给予12.6 g/（kg·d）的灭菌饮用水，每日1次，同时腹腔注射肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)抑制剂C25-140 5 mg/kg，隔日1次，连续2周。检测心肌组织TRAF6/核因子-κB(NF-κB)通路相关蛋白、mRNA表达及相关纤维蛋白水平。结果 与空白组比较，模型组大鼠肛温升高，舌象RGB值降低，房颤平均持续时间延长，心功能EF、FS降低，LA/AO升高，左心房心肌胶原容积分数、CollagenⅠ/CollagenⅢ及肝脏左外叶脂滴相对面积均升高，LDL-C、FIB水平升高，TT、APTT、PT均降低，全血黏度（低切、中切、高切）、血浆黏度、红细胞沉降率均升高，红细胞压积降低，CRP、IL-1β、IL-6、IL-17、TNF-α水平均升高，MMP9、Gal-3、α-SMA、CollagenⅠ升高（P<0.01）。与模型组比较，活血温胆方组上述各指标均改善（P<0.05或P<0.01）。蛋白质组学分析筛选出73个关键逆转蛋白，其中TRAF6为核心蛋白，并富集在NF-κB信号通路上。活血温胆方和抑制剂组均可抑制TRAF6/NF-κB通路相关蛋白、mRNA表达及相关纤维蛋白水平（P<0.05或P<0.01）。结论 活血温胆方可能通过抑制心肌组织TRAF6/NF-κB信号通路，减轻心肌炎症与纤维化反应，从而多靶点干预房颤痰热瘀阻证。
关键词：心房颤动;;活血温胆方;;痰热瘀阻证;;蛋白质组学;;肿瘤坏死因子受体相关因子-6;;核因子-κB;;心肌纤维化
基金资助：中国中医科学院西苑医院能力提升项目(XYZX0303-18)
