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作者:何花;董大立;
单位:湖南中医药大学第二附属医院骨科;
摘要:目的:探讨松果菊苷调节NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)/半胱氨酸蛋白酶-1(caspase-1)/白细胞介素(IL)-1β通路对脊髓型颈椎病(CSM)大鼠炎症反应的影响。方法:60只SD大鼠按照随机数字表法分为空白组、CSM组、松果菊苷组、NLRP3抑制剂(MCC950)组、松果菊苷+NLRP3激活剂二乙基二硫代氨基甲酸酯(DDC)组,每组12只。除空白组外,其他组大鼠均通过向C4和C5椎间隙注入0.2 mL骨形态发生蛋白(BMP)混悬液构建CSM模型。建模成功后给药,每日1次,持续4周。对大鼠进行运动功能指数评分;HE染色观察大鼠椎间盘纤维环组织病理表现;ELISA法检测椎间盘纤维环组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-18、IL-6水平;TUNEL染色检测椎间盘纤维环组织中细胞凋亡情况;qRT-PCR检测椎间盘纤维环组织中Bcl-2相关X蛋白(Bax)、p53 mRNA水平;Western blot检测椎间盘纤维环组织中NLRP3、cleaved-caspase-1、IL-1β蛋白水平。结果:与空白组大鼠相比,CSM组大鼠椎间盘纤维环结构紊乱,髓核突出;运动功能指数评分降低(P<0.05);椎间盘纤维环组织中TNF-α、IL-18、IL-6水平,细胞凋亡率,Bax、p53 mRNA以及NLRP3、cleaved-caspase-1、IL-1β蛋白水平均升高(P均<0.05)。与CSM组大鼠相比,松果菊苷组、MCC950组大鼠椎间盘纤维环结构紊乱程度减轻,髓核组织呈现出轻微皱缩的现象;运动功能指数评分均升高(P均<0.05);椎间盘纤维环组织中TNF-α、IL-18、IL-6水平,细胞凋亡率,Bax、p53 mRNA以及NLRP3、cleaved-caspase-1、IL-1β蛋白水平均降低(P均<0.05)。与松果菊苷组大鼠相比,松果菊苷+DDC组逆转了松果菊苷对CSM大鼠椎间盘纤维环炎症反应和细胞凋亡的影响,大鼠椎间盘纤维环组织病理损伤严重,运动功能指数评分降低(P<0.05);椎间盘纤维环组织中TNF-α、IL-18、IL-6水平,细胞凋亡率,Bax、p53 mRNA以及NLRP3、cleaved-caspase-1、IL-1β蛋白水平均升高(P均<0.05)。结论:松果菊苷可能通过抑制NLRP3/caspase-1/IL-1β通路抑制CSM大鼠椎间盘纤维环炎症反应和细胞凋亡,延缓椎间盘退行性变。
关键词:松果菊苷;;脊髓型颈椎病;;炎症;;细胞凋亡
基金资助:湖南省自然科学基金(2025JJ80903,2025JJ80919);; 湖南省中医药科研计划项目(B2024078);; 湖南中医药大学校级科研基金(2021XJJJ055)