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作者：张斯;柳柯;龚树生;
单位：首都医科大学附属北京友谊医院耳鼻咽喉头颈外科首都医科大学耳聋疾病临床诊疗与研究中心;
摘要：目的 建立体外模型来研究诱导M1型巨噬细胞与听神经髓鞘施万细胞之间的相互作用。方法 选取出生7 d的乳鼠C57BL/6J耳蜗组织，将神经碎片消化产生施万细胞和成纤维细胞的混合培养物，使用差速贴壁和阿糖胞苷处理收获纯化的施万细胞。使用巨噬细胞集落刺激因子以及脂多糖诱导小鼠骨髓单核细胞极化成为M1型巨噬细胞。进一步将纯化的施万细胞与诱导的M1型巨噬细胞按1∶1细胞比例共培养。采用免疫荧光染色、细胞计数、酶联免疫吸附试验来进行分析。结果 发现共培养后第3天施万细胞数量较第1天显著降低（P<0.001）；单纯施万细胞培养组及共培养组上清液脑源性神经营养因子分泌水平比较，有显著统计学意义（P<0.001）。结论 本研究成功在体外构建了听神经髓鞘施万细胞与巨噬细胞的共培养模型。这一方法对深入研究巨噬细胞对听神经髓鞘施万细胞的影响机制具有重要价值，为理解内耳免疫反应提供了基础。
关键词：听神经髓鞘;;耳蜗巨噬细胞;;施万细胞;;神经营养因子;;共培养模型
基金资助：国家自然科学基金项目(82371151,82071037);; 北京市教育委员会科研计划项目资助(KZ20231002542)
