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作者：朱浩;颜雪华;陈帅;张改月;张豪斌;杨金生;王莹莹;
单位：陕西中医药大学针灸推拿学院;陕西中医药大学第二附属医院;中国中医科学院中医基础理论研究所;中国中医科学院针灸研究所;
摘要：目的：观察电针对膝关节骨关节炎（KOA）大鼠膝关节软骨组织的保护作用，探讨miR-335-5p在电针治疗KOA中的潜在机制。方法：SD大鼠随机分为空白组、模型组、电针组，每组14只。大鼠右膝关节腔注射谷氨酸钠碘乙酸溶液（80μg/μL）复制KOA模型，在注射后第14天检测造模成功后开始给予电针组大鼠右侧“阳陵泉”“血海”电针干预，留针15 min，隔天干预1次，共两周。检测大鼠机械缩足反射阈值（PWMT）和热缩足反射潜伏期（PWTL）；步态分析仪检测疼痛诱导的步态适应性改变；苏木精-伊红（HE）染色观察右膝关节软骨组织的病理变化；实时荧光定量PCR法检测右膝关节软骨组织中miR-335-5p、Dickkopf-1相关蛋白（DKK-1）、β-连环蛋白（β-catenin）和基质金属蛋白酶13(MMP-13)mRNA的表达水平；Western blot法检测软骨组织中DKK-1、β-catenin、MMP-13蛋白的表达水平；免疫荧光染色法观察右侧膝关节软骨组织中β-catenin荧光阳性表达。结果：模型组大鼠右膝关节HE染色见大面积软骨细胞坏死，胞核溶解消失，伴以巨噬细胞为主的炎性细胞浸润，局部区域软骨面缺损，局部区域骨小梁坏死、纤维组织增生，增生区域内见新生毛细血管形成；电针组炎性细胞浸润和纤维组织增生等病理表现明显减轻。与空白组比较，模型组大鼠PWMT、PWTL及右后足的支撑时长、足印面积、足底压强，右膝关节软骨组织中DKK-1 mRNA和蛋白表达降低（P<0.001）；右膝关节软骨组织中miR-335-5p、β-catenin和MMP-13 mRNA和蛋白表达，β-catenin的荧光强度升高（P<0.001,P<0.01）。与模型组比较，电针组以上指标均逆转（P<0.001,P<0.05,P<0.01）。结论：电针能显著改善KOA大鼠的疼痛症状，促进运动功能的恢复，改善膝关节软骨组织病理形态，可能与调节miR-355-5p的表达、调控Wnt/β-catenin通路和抑制软骨基质相关降解酶的释放有关。
关键词：电针;;膝关节骨关节炎;;miR-335-5p;;β-连环蛋白
基金资助：国家自然科学基金项目（No.82074563）;; 国家中医药管理局中医药传承与创新“百千万”人才工程2022年青年岐黄学者培养项目（No.国中医药人教函[2022]256号）
