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作者:李小江;李燕萍;何庆华;帅文苑;曾俊杰;涂追;
单位:南昌大学食品科学与资源挖掘全国重点实验室;南昌大学食品学院;南昌大学中德联合研究院;
摘要:本研究建立了一种基于纳米抗体和生物发光共振能量转移(BRET)的均相免疫检测方法,实现了免疫球蛋白G (IgG)快速定量检测。以纳米荧光素酶(Nluc)为供体,以与IgG特异性结合的纳米抗体T9和蛋白L (proL)为识别元件,构建了检测IgG的BRET传感器,研究了辅助结构域和不同类型受体荧光蛋白对检测体系的影响,并对传感器的IgG响应性能进行了探究。结果表明,在添加辅助结构域、受体为绿色荧光蛋白(GFP)的情况下,BRET转移效果最好,能量转移效率近0.8。该体系具有较好的IgG响应能力,线性范围在0.195~0.775 mg/mL之间,检测限为0.068 mg/mL。本方法可以实现IgG的快速均相检测。
关键词:免疫球蛋白G (IgG);;生物发光共振能量转移(BRET);;纳米抗体;;均相免疫检测方法
基金资助:江西省自然科学基金面上项目(20212BAB205035)资助