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分析试验室2025年第03期:基于纳米抗体识别元件的生物发光共振能量转移体系检测免疫球蛋白G

来源:期刊VIP网 时间:


作者:李小江;李燕萍;何庆华;帅文苑;曾俊杰;涂追;

单位:南昌大学食品科学与资源挖掘全国重点实验室;南昌大学食品学院;南昌大学中德联合研究院;

摘要:本研究建立了一种基于纳米抗体和生物发光共振能量转移(BRET)的均相免疫检测方法,实现了免疫球蛋白G (IgG)快速定量检测。以纳米荧光素酶(Nluc)为供体,以与IgG特异性结合的纳米抗体T9和蛋白L (proL)为识别元件,构建了检测IgG的BRET传感器,研究了辅助结构域和不同类型受体荧光蛋白对检测体系的影响,并对传感器的IgG响应性能进行了探究。结果表明,在添加辅助结构域、受体为绿色荧光蛋白(GFP)的情况下,BRET转移效果最好,能量转移效率近0.8。该体系具有较好的IgG响应能力,线性范围在0.195~0.775 mg/mL之间,检测限为0.068 mg/mL。本方法可以实现IgG的快速均相检测。

关键词:免疫球蛋白G (IgG);;生物发光共振能量转移(BRET);;纳米抗体;;均相免疫检测方法

基金资助:江西省自然科学基金面上项目(20212BAB205035)资助