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作者：孙志文;王忠;于莹;赵营;张晶晶;魏紫嫣;方芳;马立才;
单位：北京市农产品质量安全中心;呼伦贝尔市海拉尔区农牧技术推广中心;北京维德维康生物技术有限公司;
摘要：本试验旨在建立可检测鸡蛋中氟苯尼考（FF）残留的均相光激化学发光免疫分析方法（AlphaLISA）。通过化学方法合成FF生物素半抗原，利用O-羧甲基羟胺法偶联FF抗体与受体微球，通过筛选确定鸡蛋样品稀释倍数，采用棋盘法确定FF抗体标记受体微球和FF生物素半抗原的浓度，最后基于FF抗体标记受体微球、FF生物素半抗原和链霉亲和素修饰供体微球，优化建立了检测鸡蛋中FF残留的AlphaLISA检测方法，并评价其灵敏度、特异性、准确性和重复性，及与国家标准方法GB 31658.20—2022《动物性食品中酰胺醇类药物及其代谢物残留量的测定液相色谱-串联质谱法》的一致性。质谱分析结果显示，FF生物素半抗原与目标分子的分子量一致（636 Da）。经评估，鸡蛋样品离心上清液采用25倍稀释方案。建立的AlphaLISA方法对鸡蛋中FF的检测限为0.57μg/kg，定量限为0.92μg/kg；添标回收率介于87.00%～99.50%，日内和日间变异系数均低于5%；与氟苯尼考胺的交叉反应率较高（93.27%），与12种常见兽药的交叉反应率极低（<0.1%）；与国家标准方法比较，2种方法在5个添加浓度点的检测结果高度一致（R2=0.997）。结果表明，本试验建立的AlphaLISA具有高灵敏度、准确性、重复性和操作简便等优点，适用于鸡蛋中FF残留的快速检测，为鸡蛋安全监测提供了高效且可行的方案。
关键词：鸡蛋;;氟苯尼考;;均相光激化学发光免疫分析方法(AlphaLISA);;半抗原
基金资助：北京市良种蛋鸡产业集群鸡蛋质量安全监测项目
