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作者：付嘉佳;李富祥;王金萍;何于雯;谢佳芮;高华峰;李小兵;
单位：云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室;云南农业大学动物医学院;
摘要：为了解云南省部分地区库蠓源蓝舌病病毒（BTV）流行情况，本试验于2023年7—10月分别从云南省昆明市宜良县和保山市龙陵县采集昆虫样品进行种属鉴定和虫媒病毒分离鉴定。基于昆虫的线粒体细胞色素氧化酶亚基Ⅰ（COⅠ）基因序列进行BLAST序列比对和种属鉴定。通过反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）检测、病毒分离培养、间接免疫荧光试验和病毒毒价测定对所获得的虫媒病毒进行分离和鉴定，以及遗传进化分析。结果显示，采集的昆虫样品分别属于尖音库蚊、隐匿库蠓、拜氏铗蠓和蠓科。其中，采自云南省保山市龙陵县的样品RT-PCR检测结果为BTV阳性，经BHK-21细胞连续传代培养，得到1株BTV分离株；间接免疫荧光试验结果显示，分离株能与BTV-16标准阳性血清发生特异性反应，初步确定该分离株为BTV-16，将其命名为YNLL-BTV16-2023，其毒价为10-5.1/0.1 mL。遗传进化分析结果显示，分离株VP2基因序列与2株日本分离株基因序列（GenBank登录号：LC586239.1和AB686220.1）核苷酸同源性最高，分别为97.20%和96.87%,VP3基因序列与中国云南省分离株VP3基因序列（GenBank登录号：MG564322.1）核苷酸同源性为99.26%,VP5基因序列与日本分离株（GenBank登录号：AB686236.1）核苷酸同源性为97.77%,VP7基因序列与2株中国分离株（GenBank登录号：AF172831.1和KT002584.1）核苷酸同源性均为98.80%。结果表明，云南省保山市龙陵县边境地区存在BTV-16毒株，该血清型病毒可通过隐匿库蠓携带。本试验为云南省边境地区BTV及其传播媒介的分布提供参考。
关键词：隐匿库蠓;;蓝舌病病毒16型(BTV-16);;分离和鉴定;;遗传进化分析
基金资助：云南地方羊种质资源开发平台建设及成果转化（202102AE090039）
