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作者:卢曼;李文婷;吴勉华;张羽;费凡;葛慧琳;
单位:南京中医药大学;江苏省中医药防治肿瘤协同创新中心;
摘要:目的 探讨消癌解毒方对H22荷瘤小鼠肿瘤生长以及Bcl-2/CytC信号通路中关键蛋白表达的影响。方法 构建H22肝癌移植瘤模型,将C57BL/6J小鼠随机分为模型组(生理盐水灌胃)、消癌解毒方低剂量组(10 g·kg~(-1)·d~(-1 )灌胃)、消癌解毒方中剂量组(20 g·kg~(-1)·d~(-1 )灌胃)、消癌解毒方高剂量组(40 g·kg~(-1)·d~(-1 )灌胃)及顺铂组(1 mg·kg~(-1)·d~(-1)腹腔注射),另设空白组(生理盐水灌胃),每组10只。给药11 d,记录各组瘤重,计算抑瘤率,苏木素-伊红(HE)染色观察病理变化,TUNEL试剂盒检测凋亡率,实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测瘤体组织中JAK2、STAT3 mRNA表达情况,蛋白免疫印迹(Western blot)检测瘤体组织Bax、Bcl-2、CytC、Caspase-3、Cleaved Caspase-3蛋白表达情况。结果 消癌解毒方高、中、低剂量组及顺铂组均能有效抑制H22荷瘤小鼠瘤体生长,抑瘤率分别为59.9%、34.5%、21.5%、67.1%;病理学改变与模型组相比,给药组病理性核分裂像减少,瘤细胞排列稀疏,表现出较好的抑制作用;TUNEL凋亡检测结果示,消癌解毒方处理后瘤体细胞呈典型凋亡征象,以高剂量组最为显著;Rt-PCR检测发现消癌解毒方干预后各组的JAK2、STAT3 mRNA表达水平下调;Western blot检测发现消癌解毒方对H22荷瘤小鼠干预后,可下调Bcl-2蛋白表达,上调Bax、CytC、Cleaved Caspase-3蛋白表达,最终激活Caspase-3蛋白,诱导肿瘤细胞凋亡。结论 消癌解毒方可抑制H22荷瘤小鼠生长及诱导肝癌细胞凋亡,这可能与调控Bcl-2/CytC信号通路中关键蛋白表达相关,从而发挥抗肿瘤作用。
关键词:消癌解毒方;;肝癌;;Bcl-2/CytC信号通路;;凋亡
基金资助:国家自然科学基金青年项目(81804058);; 第二届全国名中医传承工作室{国中医药办人教函[2022]245号};; 吴勉华全国名老中医药专家传承工作室[国中医药人教函[2022]75号];; 国家中医药管理局第七批全国老中医药专家学术经验继承工作项目{国中医药人教函[2022]76号};国家中医药管理局中医药传承与创新“百千万”人才工程(岐黄工程)岐黄学者项目{国中医药人教函[2018]284号};; 吴勉华江苏省名老中医药专家传承工作室{苏中医科教[2021]7号};; 国家级大学生创新