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作者：梁馨月;苏琳;李伟;朱杨壮壮;阎学伟;祝晓雯;胥孜杭;邹纯朴;
单位：上海中医药大学中医学院;上海市皮肤病医院;
摘要：目的 研究天门冬汤敷贴(以下均称TD敷贴)对肺癌原位模型小鼠的治疗作用及作用机制。方法 依据课题组前期构建的小鼠肺癌原位模型方法，在小鼠左侧肺叶内注射荧光素酶标记的小鼠Lewis肺癌细胞(Lewis lung carcinoma, LLC-luc)建立小鼠肺癌原位模型。将造模小鼠随机分为对照组、TD敷贴组；分别在小鼠背部以肺俞穴为中心，0.5 cm×0.5 cm为范围贴敷敷贴，对照组贴敷空白敷贴，TD敷贴组贴敷含药敷贴，每日更换敷贴，连续治疗25 d。观察小鼠体征，记录小鼠体质量及生存期。流式细胞术检测小鼠肿瘤内主要免疫细胞的变化。通过网络药理学预测天门冬汤药物作用于髓源抑制性细胞(myeloid-derived suppressor cells, MDSCs)的潜在靶点。实时荧光定量聚合酶链式反应(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction, RT-qPCR)检测小鼠白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、信号转导和转录活化因子3(signal transduction and transcription activator 3,STAT3)、精氨酸酶(arginase 1,Arg1)、一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase, iNOS)、S100钙结合蛋白A9(S100 calcium binding protein A9,S100A9)基因表达。蛋白免疫印迹(Western blot)法检测小鼠Arg1、iNOS、S100A9、STAT3、p-STAT3蛋白表达。结果 TD敷贴治疗可延长肺癌小鼠生存期(P<0.05);TD敷贴对小鼠体质量无直接影响(P>0.05);TD敷贴治疗后肺癌小鼠肿瘤中MDSCs显著降低(P<0.001),T细胞数量增加(P<0.05),其余免疫细胞如自然杀伤细胞、巨噬细胞、树突状细胞、调节性T细胞无明显变化(P>0.05)。网络药理学预测天门冬汤药物靶点通过IL-1β靶向MDSCs发挥作用。TD敷贴治疗后与MDSCs活化相关的Arg1、iNOS、S100A9 mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.01);IL-1β、STAT3 mRNA表达降低(P<0.01);STAT3、p-STAT3及MDSCs活化相关的Arg1、iNOS、S100A9蛋白表达下调(P<0.05)。结论 天门冬汤敷贴通过IL-1β/STAT3信号通路抑制MDSCs的增殖与活化从而延长肺癌荷瘤小鼠的生存期。
关键词：天门冬汤;;敷贴;;髓源抑制性细胞;;肺癌原位模型;;肿瘤外治
基金资助：国家自然科学基金项目(82274229);; 上海市青年科技启明星项目(23QA1409100);; 上海中医药大学杏林青年学者人才计划项目(B1-GY21-409-04-37)
