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作者:张新宇;刘晗;谢欣欣;孙梦琳;蒋嘉宁;杜南山;薛东齐;
单位:河南农业大学园艺学院;海南大学热带农林学院;
摘要:叶霉菌引起的叶霉病是番茄的重要病害之一,现有的Cf抗病基因易被新分化的叶霉菌小种克服。接种鉴定发现Cf-12高抗多个叶霉菌生理小种,但其抗病机制有待解析。研究首先对Cf-12基因进行亚细胞定位,利用酵母双杂交膜系统筛选Cf-12互作蛋白。结果表明:Cf-12蛋白定位在细胞膜上,虽成功构建诱饵质粒p BT3-SUC-Cf12,但该诱饵未通过蛋白功能验证,无法进行酵母膜体系筛库试验;遂构建p GBKT7-Cf12诱饵质粒进行酵母双杂交核文库筛选,诱饵质粒对Y2H Gold酵母无毒且无自激活活性。将含p GBKT7-Cf12的诱饵质粒酵母菌与番茄pGADT7-cDNA文库质粒进行共转筛库,初筛获得16个克隆,复筛获得4个阳性克隆,编码基因分别为Solyc06g062370.3、Solyc12g005850.2、Solyc06g071370.1和Solyc03g093690.3。
关键词:番茄;;叶霉病;;Cf-12;;酵母双杂交;;互作蛋白
基金资助:国家自然科学基金项目(32472728,32202486);; 河南省重点研发与推广专项(232102110011)