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作者：刘龑;徐蕴博;张琦;徐倩倩;尹智;刘忠华;翁晓刚;
单位：东北农业大学生命科学学院;北方寒区猪智能化繁育与养殖教育部工程研究中心(东北农业大学);
摘要：为建立1种准确可靠的猪胚胎微量细胞性别的鉴定方法，将不同数量细胞样本进行DNA提取纯化后进行PCR扩增，结果表明：当使用纯化的DNA模板进行1轮PCR扩增时，SRY/ZFX引物可在10个细胞中有效扩增，而AMEL和SUSY/SUS12S引物仅在50个细胞以上有效。与纯化DNA模板相比，使用细胞裂解液进行PCR扩增的效果更优，但单次PCR中SUSY/SUS12S和AMEL引物在1或10个细胞样本中未检测到特异性条带。通过设计巢式PCR引物，成功在单细胞中扩增目标基因，特别是AMEL引物效果最佳，并通过Y染色体DNA-FISH检测验证PCR结果准确性。此外，通过在体外受精囊胚中测试建立的巢式PCR方法，表现出良好特异性。
关键词：猪;;胚胎;;单细胞;;巢式PCR;;性别鉴定
基金资助：国家自然科学基金项目（32072733）
