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作物杂志2025年第06期:TRV介导的向日葵VIGS体系的构建

来源:期刊VIP网 时间:


作者:周菲;黄绪堂;谢鹏远;王静;刘岩;崔佳伟;唐立郦;王文军;

单位:黑龙江省农业科学院经济作物研究所;新疆生产建设兵团第十师农业科学研究所;

摘要:为解决缺少稳定遗传转化体系而制约向日葵基因功能研究的问题,以向日葵(Helianthus annuus L.)‘R5’为材料,以向日葵八氢番茄红素脱氢酶(phytoene desaturase,PDS)基因作为报告基因,构建其VIGS重组载体pTRV2-HaPDS,叶背注射和真空渗透2种方法侵染向日葵子叶。结果表明,叶背注射在向日葵上不能成功侵染;采用真空渗透法,2次抽真空至-0.08 MPa,每次保持3 min,接种20 d后观察到基因沉默现象,新生真叶出现部分区域颜色变浅迹象,接种30 d后真叶白化表型更为明显,大部分植株第2、3对真叶出现更明显白化表型,但分布不均匀,在第4对真叶上只表现轻微白化,白化表型的维持时间大约是侵染后20~75 d,沉默效率约为57%,qRT-PCR结果发现白化植株的HaPDS基因表达量显著低于对照组,证明基因沉默成功。

关键词:向日葵;;VIGS;;HaPDS基因;;基因沉默

基金资助:黑龙江省自然科学基金联合引导项目(LH2023C096);; 国家特色油料产业技术体系项目(CARS-14)