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作者:帅文娜;李佳乐;郭子强;罗梦;李丽薇;周艳君;姜一峰;童武;童光志;李兆龙;高飞;
单位:中国农业科学院上海兽医研究所;广西大学动物科学技术学院;扬州大学/江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心;福建省农业科学院畜牧兽医研究所;上海市兽医生物技术重点实验室;
摘要:旨在制备猪细小病毒(PPV)VP2的多克隆抗体,并进行其检测能力验证。将PPV VP2克隆至原核表达载体pCold-TF,由1 mmol/L IPTG诱导得到VP2蛋白;纯化后VP2蛋白免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体并进行ELISA、Western blot、间接免疫荧光试验(IFA)验证其反应性。ELISA检测结果显示,多克隆抗体效价达1∶128 000;Western blot和IFA分析表明,其能特异性识别和结合PPV,说明重组VP2蛋白具有较好的免疫原性和反应原性。本研究为VP2血清学检测方法的建立及其蛋白的功能研究提供了材料。
关键词:猪细小病毒;;VP2蛋白;;多克隆抗体;;原核表达
基金资助:国家重点研发计划项目(2022YFD1800800,2021YFD1801401);; 上海市自然科学基金项目(21ZR1476900);; 国家自然科学基金项目(32373050,32072861);; 中国农业科学院科技创新工程项目(CAAS-CSLPDCP-202402);; 上海市兽医生物技术重点实验室开放基金项目(BD1500010)