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作者:李澜;高兵;胡婧;刘攀;李丽雅;李瑞华;王茎;
单位:安徽中医药大学针灸推拿学院;安徽中医药大学新安医学与中医药现代化研究所;安徽中医药大学中医学院;安徽中医药大学新安医学教育部重点实验室;
摘要:目的:观察艾灸“肺俞”“心俞”对慢性心力衰竭(CHF)大鼠心肌Pan3基因第2-5外显子的环状RNA(circ PAN3)、叉头框O3蛋白(FOXO3)及B淋巴细胞瘤-2/腺病毒E1B19kDa相互作用蛋白3(BNIP3)的影响,探讨艾灸减轻心肌纤维化的潜在作用机制。方法:60只SPF级雄性SD大鼠随机取10只作为正常组,剩余大鼠采用冠状动脉左前降支(LAD)结扎术制备CHF模型,将模型制备成功的40只大鼠随机分为模型组、艾灸组、雷帕霉素(RAPA)组、艾灸+RAPA组,每组10只。艾灸组予温和灸双侧“肺俞”“心俞”,每次30 min;RAPA组腹腔注射自噬激动剂RAPA(1 mg/kg);艾灸+RAPA组先腹腔注射RAPA,后予温和灸双侧“肺俞”“心俞”。均每日干预1次,连续4周。干预结束后采用心脏彩超检测大鼠射血分数(EF)、左心室短轴缩短率(FS);ELISA法检测大鼠血清胎盘生长因子(PLGF)含量;HE染色、Masson染色观察大鼠心肌组织形态及胶原容积;实时荧光定量PCR法检测大鼠心肌组织circPAN3、FOXO3、BNIP3 m RNA表达;Western blot法检测大鼠心肌组织FOXO3、BNIP3蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠心肌细胞排列紊乱,纤维化严重,胶原容积增加(P<0.01);EF、FS值及心肌组织circPAN3 mRNA表达降低(P<0.01),血清PLGF含量及心肌组织FOXO3、BNIP3 mRNA和蛋白表达升高(P<0.01)。与模型组比较,艾灸组大鼠心肌纤维化程度减轻,胶原容积降低(P<0.01);EF、FS值及心肌组织circPAN3 mRNA表达升高(P<0.01),血清PLGF含量及心肌组织FOXO3、BNIP3 mRNA和蛋白表达降低(P<0.01)。与模型组比较,RAPA组大鼠相关指标进一步恶化(P<0.01)。与RAPA组比较,艾灸+RAPA组大鼠心肌纤维化程度减轻,胶原容积降低(P<0.01);EF、FS值及心肌组织circ PAN3 m RNA表达升高(P<0.01),血清PLGF含量及心肌组织FOXO3、BNIP3 m RNA和蛋白表达降低(P<0.01)。结论:艾灸可减轻CHF大鼠心肌纤维化,其机制可能与上调心肌组织circPAN3表达,降低FOXO3、BNIP3表达,抑制心肌细胞过度自噬有关。
关键词:慢性心力衰竭;;艾灸;;肺俞穴;;心俞穴;;心肌细胞自噬;;心肌纤维化;;Pan3基因第2-5外显子的环状RNA(circPAN3)
基金资助:安徽省教育厅重点项目:KJ2021A0570、2023AH050796;; 新安医学与中医药现代化研究所“揭榜挂帅”项目:2023CXMMTCM022