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中华骨与关节外科杂志2025年第06期:miR-98-5p靶向调控基质金属蛋白酶1对强直性脊柱炎成纤维细胞成骨分化的影响

来源:期刊VIP网 时间:


作者:吴礼杨;周斌;梁伟;熊英辉;杨轩;尹文化;

单位:粤北人民医院骨科;

摘要:目的:探讨miR-98-5p靶向调控基质金属蛋白酶1(MMP1)对强直性脊柱炎(AS)成纤维细胞成骨分化的影响。方法:收集2021年10月至2023年9月于粤北人民医院行全髋关节置换术的7例AS患者和7例创伤性骨折患者的滑膜组织。实时荧光定量聚合酶链反应(q RT-PCR)检测AS成纤维细胞和正常成纤维细胞中miR-98-5p和MMP1 mRNA的表达水平;将AS成纤维细胞分为对照组、miR-NC组、miR-98-5pmimic组、miR-98-5pmimic+oe-NC组、miR-98-5pmimic+oe-MMP1组。qRT-PCR检测细胞中miR-98-5p、MMP1 mRNA表达水平;CCK-8法检测细胞增殖;ELISA试剂盒检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-1β(IL-1β)水平;显色法检测碱性磷酸酶(ALP)活性、骨钙蛋白(OCN)、Ⅰ型胶原氨基端延长肽(PⅠNP)含量;Western blot检测细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)、骨形态发生蛋白-2(BMP-2)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、核心结合因子-α1(CBF-α1)和MMP1蛋白表达水平;验证miR-98-5p与MMP1的靶向关系。结果:与正常成纤维细胞比较,AS成纤维细胞中MMP1 mRNA表达水平升高,miR-98-5p表达水平降低(P均<0.05);与对照组和miR-NC组相比,miR-98-5pmimic组AS成纤维细胞miR-98-5p表达水平升高,MMP1 mRNA表达水平、光密度(OD)_(450)(24 h、48 h)值、IL-1β水平、TNF-α水平、IL-6水平、ALP活性、OCN和PⅠNP水平、PCNA水平、BMP-2水平、TGF-β1水平、CBF-α1水平和MMP1蛋白表达水平均降低(P均<0.05);与miR-98-5pmimic+oe-NC组比较,miR-98-5pmimic+oe-MMP1组AS成纤维细胞miR-98-5p表达水平差异无统计学意义(P>0.05),MMP1 mRNA表达水平、OD_(450)(24 h、48 h)值、IL-1β水平、TNF-α水平、IL-6水平、ALP活性、OCN和PⅠNP水平、PCNA水平、BMP-2水平、TGF-β1、CBF-α1水平和MMP1蛋白表达水平均升高(P均<0.05)。结论:miR-98-5p可抑制AS成纤维细胞炎症和成骨分化,可能与靶向调控MMP1有关。

关键词:miR-98-5p;;基质金属蛋白酶1;;强直性脊柱炎;;成纤维细胞;;成骨分化

基金资助:广东省医学科学技术研究基金(A2022268);; 韶关市卫生健康科研项目(Y22014)