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作者：张艳;董苏洁;张志东;李彦敏;
单位：西南民族大学畜牧兽医学院;中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点试验室;甘肃省病原生物学基础学科研究中心;
摘要：利用慢病毒包装系统构建稳定表达钾通道四聚化结构域蛋白1(potassium channel tetramerization domain containing 1,KCTD1)的猪肾细胞系（PK15），并初步探索KCTD1对口蹄疫病毒（FMDV）和水疱性口炎病毒(VSV)复制的影响，为深入理解KCTD1在病毒复制中的调控作用提供科学基础。本试验构建重组质粒PLV-puro-3×Flag-KCTD1-HA，并将其转染HEK293T细胞，分析其对VSV复制的影响。随后利用慢病毒包装技术成功获得稳定过表达KCTD1的PK15细胞系（PK15/KCTD1细胞系）。本试验采用Westernblot 、q PCR和病毒滴度测定等方法，分析FMDV和VSV在PK15/KCTD1细胞系中的复制水平。结果显示，在PK15/KCTD1细胞系中，FMDV蛋白水平、RNA载量和病毒滴度显著高于空载体转染对照组细胞；同样在该细胞系中VSV的复制水平也显著高于对照组细胞。本研究成功构建了稳定表达KCTD1的PK15/KCTD1细胞系，并证实KCTD1对FMDV和VSV复制具有促进作用。
关键词：KCTD1;;慢病毒包装;;E3泛素连接酶;;细胞系;;口蹄疫病毒;;水疱性口炎病毒
基金资助：国家重点研发计划项目（2024YFD1800304）
