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作者:李濮辰;包福祥;刘艳龙;赵绮欢;高敏;李宝慧;祁娜;王宇;
单位:内蒙古农业大学兽医学院;农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室;国家级动物医学实验教学示范中心,内蒙古农业大学;包头市动物疫病预防控制中心;内蒙古自治区农牧业技术推广中心;
摘要:本试验利用猫CD20胞外区多肽免疫成年双峰驼,扩增得到的单域抗体基因转化大肠杆菌TG1中,构建噬菌体抗体库。对该抗体库进行富集与筛选,得到与猫CD20胞外区多肽有高结合活性的重组噬菌体,将阳性克隆基因连接至原核表达载体pET-22b(+),表达得到抗猫CD20特异性单域抗体,通过ELISA、Western-blot以及细胞免疫荧光等试验方法对制备的抗CD20特异性单域抗体的亲和活性进行了鉴定。结果表明,该抗体具有较高的亲和力,显示出良好的抗原结合活性和免疫学反应性。本研究对以CD20为靶点的猫B细胞淋巴瘤的诊断和治疗提供了新手段,具有潜在的临床应用价值和科学研究意义。
关键词:猫CD20;;单域抗体;;噬菌体展示技术;;原核表达;;噬菌体ELISA
基金资助:国家自然科学基金项目(32260893);; 内蒙古自治区科技计划项目(2023YFXZ0002);; 内蒙古自治区“高等学校青年科技英才发展项目”(NJYT23094);; 内蒙古自治区直属高校基本科研业务费项目(BR250101);; 内蒙古自治区自然科学基金项目(2022MS03019)